柴胡皂苷a人工抗原的合成及免疫原性鉴定.pdfVIP

北京中医药大学学报 第38卷第2期2015年2月 126 of ofT】础tionalChirleseMedicineV01．38No．2Feb．2015 JoumalBeijingUlliversity ·中药化学· 柴胡皂苷a人工抗原的合成及免疫原性鉴定+ 冯会宾赵琰赵灵灵单文超赵妍张越王庆国屈会化4 (北京中医药大学北京100029) 摘要：目的 合成柴胡皂苷a(sSa)免疫抗原和包被抗原，为柴胡皂苷a单克隆抗体的制备及免疫 分析方法的建立奠定基础。方法采用高碘酸钠氧化法分别合成柴胡皂苷a免疫抗原(SSa—BsA) 和包被抗原(SSa．PLL)；用紫外光谱和薄层色谱法鉴定人工抗原是否偶联成功，并免疫小鼠，通过 薄层 ELISA方法测定血清中抗体效价，通过间接竞争EUSA(ic—ELISA)检测抗体特异性。结果 色谱法检测结果显示柴胡皂苷a与BSA／PLL偶联成功。小鼠经SSa-BsA免疫后，体内可产生抗柴 胡皂苷a抗体，效价l：80000以上。结论与其他人工抗原的鉴定方法相比，薄层色谱法具有独 特的优势。成功合成的柴胡皂苷a人工抗原可用于下一步的单克隆抗体制备以及相应免疫方法的 建立。 关键词：柴胡皂苷a；人工抗原；高碘酸钠氧化法；免疫分析方法；抗柴胡皂苷a抗体 中图分类号：R284．1 doi：10．3969／i。issn．1006-2157．2015。02。012 and iden筒∞tionofani6cial of Synthesis immunogellicity antigen 4 a SaikosapoIlin FENG Hui—bin，ZHAOYan，ZHAOLing—ling，SHANWen—chao，ZHAOYan，ZHANGYue，WANGQing— Hui—hua’ guo，QU (Beijing ofChinese 100029) University Medicine，Beijing To establish linkedimmunosorbent a Abst船ct：ObjectiVean．enzyme assay(EUSA)forSaikos印onin onthebasisofthe of and of MethodThe synthesis immunizingantigencoatingantigenSaikosaponin． of methodSodium Oxidationwasusedto and Pe珊anganate synthesizeimmunizingantigen(SSa—BSA) a successofthe ofartificial coatingantigen(SSa—PLL)ofSaikosaponinseparately；t}le synthesis antigens wasexaIIlined UV IIlicewere