EP0动员EPCs促进急性创面血管化的实验研究.pdfVIP

1．2实验方法：(1)建立全层皮肤缺损小鼠模型，EP0接文献剂量与生理盐水 配置成外用液，A组分别在制模后给予EP0 组小鼠分别在制模后3d，7d，14d，每个时间点每组随机取6只小鼠，处死后， 纪录创面大小计算创面愈合率，切取创面组织，观察病理形态学组织变化，使用 免疫组化观察创面cD34标记阳性的血管新生情况。(3)采用显微镜测定新生微血 管密度，计算创面愈合率。 1．3结果取均值以x±s表示，统计学采用t检验并进行对比分析。 2．结果EP0动员组与对照组动员后7天创面cD34标记血管情况 剿 縻 EPo外用组 NS对照组 3．讨论 创伤是一个重要的疾病，在我国每年因创伤致伤数百万，更让人担忧的是， 专家们预测，进入21世纪以后，创伤人数可能成倍地增长。为此，如何加快创伤 后组织修复是临床上的一个重要问题，也是提高损伤康复后生活质量的需要，因 此，组织损伤的修复成为目前外科领域研究的热点课题。虽然，目前人们研究并 发现了许多具有促增殖、抗凋亡的促修复因子，其中最有代表性的是生长困子 bFGF’KGF等，但是，由于这些因子中有的受到创面受体表达缺乏、变异、蛋白 酶浓度升高及生长因子比例失衡等因素的影响，难以达到理想的促愈效果，有的 甚至有增加瘢痕形成的副作用，使这些因子的应用受到很大的限制。因此．探讨 正常创伤愈合的机制，寻求新的作用途径的促增殖剂，对促进创伤愈合尤其是放 创复合伤、大面积创伤、烧伤等难愈伤口有着十分重要的意义。 组织创伤后的愈合是各种修复细胞增殖、分化、迁移、凋亡的过程，又是一 系列不同类型细胞、结构蛋白、生长因子和蛋白激酶等形成网络式交互作用的结 果“1。创伤修复的机制大致涉及五种作用：(1)炎症反应和免疫细胞的作用。炎 症反应是组织修复的基础，它有利于创伤的修复；炎症细胞虽不直接参与填充缺 损，但它们能清除坏死组织和异物，防止感染发生，还通过分泌细胞因子调控创 伤愈合过程，为修复细胞的活动创造条件，调节指导修复过程心1。(2)成纤维细 胞和细胞外基质的作用。成纤维细胞(fiborblast，FB)是主要的修复细胞，它是 创伤修复的工程师、建筑者和管理员，是构成肉芽组织的主要细胞成分之一，也 是合成和分泌胶原、纤维连接蛋白、弹性蛋白、蛋白多糖和透明质酸等细胞外基 质的主要细胞；还是多种细胞因子的主要分泌细胞，它可通过产生的细胞因子来 进行自分泌或旁分泌调节，调控修复过程。细胞外基质(ECM)成分包括胶原、蛋 白多糖和粘连糖蛋白等；EcM不仅决定细胞的形态，还可控制细胞的生长和分化， 调节细胞的运动。(3)内皮细胞和新血管形成的作用。内皮细胞也是主要的修复 细胞之一，是形成毛细血管的主要细胞，为伤口组织提供足够的氧和营养物质， 保证伤口愈合：内皮细胞也能分泌多种细胞因子，参与创伤修复的调控。(4)角 质形成细胞和上皮再生的作用。上皮再生是伤口愈合的重要过程，由上皮组织的 角质形成细胞的迁移来完成，使暴露的伤口重新被上皮覆盖。角质形成细胞也能 通过分泌的细胞因子，直接或间接参与创伤修复的调控。(5)细胞因子的作用。 参与创伤修复的细胞因子包括各种趋化因子、生长因子和NO等，它们可调节炎性 细胞活性，促进其趋向性移动，促进上皮细胞、成纤维细胞和血管内皮细胞的分 裂增殖，加速上皮再生和肉芽组织生长的进程。 促红细胞生成激素(EPO)分子由165个氨基酸组成，相对分子量为34l(D。EPo 是体内红细胞增殖、分化以及维持外周循环红细胞数量正常的最主要的调节因 子。机体血氧的缺乏是刺激EP0分泌的重要因素，EP0在体内分泌后与骨髓中 红系祖细胞、幼红细胞表面红细胞生成素受体(erythropoietinrec印tor，EPOR) 白激酶)激酶等途径调节红系的增生和分化，增多红细胞数和血红蛋白含量，稳 定红细胞膜，提高红细胞膜抗氧化酶功能，纠正贫血乜川。现有的研究表明EP0和 EPOR不仅仅存在于幼红细胞表面，也表达在不同的非红细胞生成组织，如神经 细胞、上皮细胞、心肌、平滑肌细胞、肿瘤细胞等陆3。研究结果表明，在脑部肿 瘤中，EP0经由Akt径路刺激GATA—l的活性及磷酸化发挥作用。有研究表明： EP0触发多种信号转导通路，磷脂酰肌醇3一激酶P工3K／AKT／NF—K B是其中重要的 信号通路之一。EP0抑制AKT的磷酸化，并降低效应基板N