半夏及其混淆品水半夏蛋白高效毛细管电泳法鉴别.pdfVIP

中药发展论坛 1207 半夏及其混淆品水半夏的蛋白高效毛细管电泳法鉴别 冯成强1 张文生1 崔光红2黄璐琦2 1．北京师范大学资源学院中药资源与资源药物研究所，北京(100088) 2．中国中医研究院中药研究所，北京(100091) 目前，中药材市场比较混乱，假冒伪劣药材很多。半夏Pinellia 科植物的干燥块根，品种单一。是临床上常用的一味有毒中药，配伍量大，市场供不应求。由于野生 半夏货源短缺，人工培育赶不上需求，市场上的掺伪品和混伪品时有发生。天南星科植物戟叶犁头尖 水半夏[Typhonium 与半夏有相似的燥湿化痰、止咳作用，但止呕作用不明显，在本草中未见记载，属正品半夏的混淆 品，故不宜代半夏使用。因此，正品与非正品的鉴别甚为重要。有报道，从药材外形、显微、理化及 二维相关红外光谱法等几方面，对半夏及其伪品水半夏进行过鉴别研究，但这些方法操作较繁杂，有 的专属性不强，我们拟以中药材细胞中普遍存在的，受遗传基因控制的蛋白多肽分子为指标，用高效 毛细管电泳(卜Ⅱ，CE)来探索和论证鉴别半夏的可行性。 一、材料与方法 (一)材料 正品半夏：正品半夏Pinellia 天南星科植物戟叶犁头尖水半夏[Typhonium 肃、安徽由中国中医研究院中药研究所黄璐琦研究员鉴定。 (--)仪器与试剂 75tanx50em(河北永年光纤厂)。所用试剂均为分析纯。 (三)电泳条件 用缓冲液冲洗至基线平稳后开始进样，每两次进样之间设定0．1mol／L氢氧化钠冲洗毛细管2min，再 用去离子水冲洗3min，然后用缓冲液冲洗5min。 (四)样品溶液的配制， 心20rain，取上清液备用。Tris一甘氨酸提取液：Tris 0．69，甘氨酸2．瞻，加蒸馏水溶解至1000ml；碱性 蛋白提取液：riffs—HCL 液：柠檬酸80 32 2．8。 mmol／L，Na2HP04mmol／I．，抗坏血酸5mmol／L，巯基乙醇10mmol／L，pH 二、结果 中医药发展与人类健康 ·综合3种提取液的图谱，可以看出半夏与水半夏中性提取液的眦图谱基本一致，而酸性提取 液和碱性提取液的HPCE图谱有一定差异，容易加以区别。 三、讨论 1．HPCE是近年来迅速发展起来的～种重要分离技术，已在多肽、蛋白、核酸、手性化合物等生 物活性物质的分离分析方面显示了极为广阔的前景。1997年胡平等报道提取菟丝子种子植物蛋白用 HPCE法进行生药鉴定，结果表明不同种间成分和含量上存在明显差异，认为根据种子植物蛋白的电 泳图谱，可有效地鉴别菟丝子的来源。陈振德等报道了对酸枣仁及其混淆品、鸡内金与鸭内金采用 HPCE进行鉴别；陈志良等报道了对枸杞子采用HPCE进行鉴别；候连兵等报道了对三七及其混淆品 采用HPCE进行鉴别；结果表明种间区别较明显，认为该方法速度快，分辨力强，重现性好。 2．从我们应用HPCE对半夏和水半夏蛋白检测结果看，半夏及其水半夏在3种提取液中的HPCE 吸收峰有明显的差异，半夏与水半夏分别取自甘肃、浙江、安徽等不同产地，重复性良好，故本实验 结果可供半夏及其水半夏的鉴别作参考。 栀子提取物ZG对单纯疱疹病毒1型受体表达量的影响 崔晓兰1郭姗姗1王秀坤1 张媛媛2黄洋1赵晔1巩文峰1 1．中国中医研究院中药研究所，北京(100700) 2．中国科学院上海药物研究所，上海(201203) 病毒感染宿主细胞首先必须吸附于细胞膜上特异的病毒受体，二者的结合才能使病毒进入继而感 染细胞，病毒受体是决定病毒组织器官亲嗜性的关键因素。对病毒受体的研究一直是医学界的热门之 一。目前已知细胞表面的硫酸乙酰肝素、纤维细胞生长因子受体、补体受体CRl可介导HSV一1与细 受体家族成员。在本实验室以往实验的基础上，发现栀子提取物ZG在体内和体外均有较好的抗单纯 白(VAP)在病毒对宿主细胞感染过程中起着非常重要