HPLC-MS%2fMS法测定血浆中的丙戊酸镁及其大鼠体内药代动力学的研究.pdfVIP

HPLC—MS／MS法测定血浆中的丙戊酸镁及其 大鼠体内药代动力学研究牛 张娟红，王荣’，谢华，贾正平’，王娟，费改顺，李文斌，张军莉 (兰州军区兰州总医院国家药物临床试验I期研究室，兰州730050) 癫痫是神经系统疾病中仅次于脑卒中的第二大常见疾病【11，是由多种原因引起的慢性 脑部疾患，以大脑神经元过度放电所致的反复发作为特征，但持续状态反复发作有损于大脑， 严重情况可造成死亡，少数患者甚至需要终身服用f23】。临床上以服用抗癫痫药物为主要的 治疗手段，常用的抗癫痫药有丙戊酸(VPA)、苯巴比妥(PB)、卡马西平(cBz)等，但作为控 制癫痫发作的药物具有治疗窗窄、个体差异大、毒性强、服药周期长的特点，其血药浓度的 测定是调整剂量、评价不良反应和保证疗效的重要参考。为了使抗癫痫药物治疗更科学、安 全有效14,5J，必须先进行血药浓度监测，再根据患者的具体情况进行个体化给药。因此，用 药监测具有重大意义。 丙戊酸镁是临床常用的抗癫痫药物，其测定方法主要为气相色谱(GC)法[6-s]，高效液 高分析工作效率，本实验在文献报道的基础上进一步研究，通过优化色谱和质谱条件，建立 了一种简单、高效和灵敏的HPLC．Ms以ⅥS测定血浆中丙戊酸镁的方法，并应用于大鼠血浆中 丙戊酸镁的药代动力学研究。 1实验部分 1．1仪器与试剂 应用生物系统公司)；高速离心机(上海安亭科学仪器厂)；超声波清洗器(奥特赛恩斯仪 器有限公司)；涡旋混匀器(金坛市金城教学仪器厂)等。 丙戊酸镁缓释片(批号080901)购自湖南湘中制药有限公司；对照品丙戊酸镁(批号： RDS／8182)购自中国药品生物制品检定所，纯度99％；硫酸为分析纯购自北京试剂公司， 甲醇为色谱纯购自德国默克公司，灭菌注射用水购自西安双鹤制药有限公司。 1．2样品分析方法 1．2．1色谱质谱条件 XR．ODS柱(3．0mm 色谱柱：Shim．pack I．D．x75mm)，流动相B为甲醇，A为0．1％甲酸 min 水溶液，O～1．0 80％B，80％B平衡1．O～5．Omin；流速：0．40mL。min-1，柱温：25。C，进 样量：10止，整个分析流程用时5min。 基金项耳：国家科技部重大资助项目(No2008ZXJ09014--010) 作者简介：张娟红，女，硕士研究生主要研究方向体内药物分析’通讯作者：贾正平，男，博士生导师主要研究方向临床药 学Tel(0931)8994652 E-mial：Wangrong一69@163．com． 208 度(TEM)：380C；解离电压(DP)：689；入口电压(EP)：9 7；碰撞能量(cE)： II严1。丙虞酸镁检测离子,对为m／z3124十m／z1022。 1．2．2 Wister走鼠药代动力学实验 083、025、 大鼠随机分为2组，适应性喂养l周．分别以20mgkf‘的齐J量灌胃给药，于给药后O O5，0 75、l、1．25、2、3、5、8、12、24、36、48、72、96h由眼眶取血02mL。迅速加入 盛有肝素的05mL塑料离心管中．3000 r．miff‘离心5rain，取血浆于．20℃贮存，待用H。 1．2j时照品溶泣的帝j备 精密称取丙戊酸镁对照品0．000509于5mL容量瓶，甲醇溶解定容至刻度，振动混勾． EⅡ得1001培mU。丙戊酸镁储备液．置于4℃冰箱中保存。将储备液用大鼠空白血浆按梯度稀 释成6．25、12 mL’对照品 溶液．置于4℃冰箱中保存备用． 1．2．4血装样品处理 5mL塑料离心管中，加入3llL6toolL1 准确吸取100止血浆置于O H2SO。，涡旋混匀， 再加入200止