原创力文档- 1、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
- 2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
- 4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
- 5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次， 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
泸州医学院学报 年 第 卷 第 期
2006 29 5
460 JournalofLuzhouMedicalCollege Vol.29No.5 2006
磷酸化蛋白质检测技术研究进展
严冬梅 综述,李 洪 审校
(泸州医学院生物化学教研室,四川泸州 )
646000
中图分类号 文献标识码 文章编号 ( )
TQ937 A 1000-266920065-0460-02
蛋白质的磷酸化修饰是生物体内重要的共价修饰方式之 检测。对于磷蛋白的检测则是用抗磷酸化抗体免疫检测分离
[2]
一,其磷酸化和去磷酸化这一可逆过程,受蛋白激酶和磷酸酶 的磷酸化蛋白质。 等 利用 、抗酪氨酸磷酸
OttoH SDS
的协同作用控制。酶蛋白的磷酸化是在蛋白激酶的催化下,由 化特异抗体进行免疫印迹、胶内酶解以及质谱分析技术鉴定
ATP提供磷酸基及能量完成的,而去磷酸化则是由磷蛋白磷 得到了8种与核膜相关的酪氨酸磷酸化蛋白质。真核细胞中
酸酶催化的水解反应。在哺乳动物细胞生命周期中,大约有 最常见的磷酸化修饰是在蛋白质的丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸
1/3的蛋白质发生过磷酸化修饰;在脊椎动物基因组中,有 残基上,侧链羟基磷酸化抗丝、苏氨酸磷酸化抗体抗原决定簇
[3]
5%的基因编码的蛋白质是参与磷酸化和去磷酸化过程的蛋 较小,使得抗原抗体的结合位点存在空间障碍,特异性较差 ,
[1]
白激酶和磷酸 酯 酶 。真核细胞的蛋白质磷酸化位点主要发 所以很少被用来进行免疫印迹反应。抗酪氨酸磷酸化抗体特
()
生在丝氨酸 异性较好 [4]
、苏氨酸 和酪氨酸 残基侧链的羟基 ,也最为常用 。免疫印迹通常和免疫沉淀结合,因为
(Ser) (Thr) (Tyr)
上,不同的蛋白激酶可识别和修饰不同蛋白质的不同位点,生 磷酸化蛋白质含量低,先用免疫沉淀将磷蛋白富集,可以降低
[5]
物体内能被磷酸化修饰的蛋白质组成磷酸化蛋白质组(phos- 非磷酸化蛋白的干扰。Gronborg等 对多种商品化的抗磷酸
,磷酸化蛋白质组将是蛋白质翻译后修饰的研 丝氨酸 苏氨酸抗体的免疫沉淀性能进行了评价,发现有 种
phoproteome) /
文档评论（0）