鹿白细胞抗菌肽的体外抗菌试验.pdfVIP

维普资讯 2007，41(7)：13～15，18／陈丽颖，等 中国兽药杂志 ·13· 鹿 白细胞抗菌肽的体外抗菌试验 陈丽颖，杨国宇，王艳玲，杨 霞，金 钺 (河南农业大学牧医工程学院，河南郑州 450002) [收稿 日期】2007一O1—22 [文献标识码】A [文章编号】1002—1280(2007)07—0013—04 [中图分类号】$859．796 [摘 要] 应用氯化铵裂解、超声波破碎和离子交换层析等方法，从鹿 白细胞 中提取出阳离子抗 菌肽混合物。经平板抑菌试验初步检测其抗菌活性后，采用微量反应板法测定了鹿抗菌肽对大 肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌等9个标准菌株的最小抑菌浓度 (MIC)，结果显示，该混合 抗菌肽对革兰氏阳性细菌、革兰氏阴性细菌和真菌均具有抑制活性。体外杀菌曲线试验表明，鹿 抗菌肽的杀菌作用是非浓度依赖性的，杀菌效果迅速，可在2min内杀灭63．8％的受试细菌。 [关键词] 鹿 白细胞；抗菌肽；MIC；杀菌曲线 InvitroBactericida1．ExperimentsofAntimicrobialPeptidesfrom DeerLeukocytes CHENLi-ying，YANG Guo-yu，WANGYan-ling，YANGXia，JINYue (CollegeofAnimalHusbandryand VeterinarySciences，HenanAgriculturalUnivemi~，Zhengzhou，Henan450002；China) Abstract：Cationicantimicrobialpeptideswereextractedfrom deerneutrophilsthroughNH4C1lyses，sonication andion-exchangechromatography．MinimalInhibitionConcentrations(MICs)oftheextractweredetermined against9stnadardstrainssuchasE．coli，S．aureusandC．albicansbymena sofmicrodilution．Theresultsshowed thattheexrtactofpeptideswasactiveforGram-positive，Gram-negativebacteriaandyeast．Theinvitrotime-kill curveexperimentsrevealedthatthekillingpotential ofthepeptideswasconcentration-independentandimmediate， 、 witll63．8％ ofthetestbacteriakilledin2minutes． Keywords：deerleukocytes；antimicrobial peptides；MIC；time-killcurve 天然抗微生物肽 (natimicrobialpeptides，AMP) 存在 1种 Cathelicidin和 1种 p-defensin等抗菌肽 又称为抗菌肽 (antibacterialpeptides，ABP)，是一类 成分 J。本研究旨在探索鹿抗菌肽的杀菌动力学， 具有强抗菌作用的阳离子多肽，在生物机体的先天 为进一步研究和应用打下基础。 免疫和抗感染免疫中起着非常重要的作用。由于 1 材料与方法 抗菌肽抗菌活性高、抗菌谱广和不易引起耐药性等 1．1 试验材料 优点，被认为有很大的开发价值和广阔的应用前 1．1．1 鹿血 采 自郑州郊区某养鹿场。在割取鹿 景 _1J。哺乳动物白细胞中的抗菌肽主要是 Cathe． 茸季节无菌采集鹿血于加有 10％柠