巴戟天水提液对自然衰老小鼠脑组织中单胺类神经递质含量的影响.pdfVIP

=嘲嘲鬟 蔼鼹 黧1譬麓器器黑蓉徽淼篡磊善蒜讨厶凑滕2012海I陕两寒曩CSNR全蕾第10靥中药及天然药物资源学术研讨会 表1 巴戟天水提液对小鼠负重游泳时间的影响(聊P日肚sd。玎=8) 注：与空白对照组比较+pO．05，+节o．01 2．3对模型小鼠脑湿重指数的影响 在进行力竭性游泳后小鼠休息1d，白天正常喂食、喂水，晚上开始禁食，第2天脱颈椎处死， 立即剪开头皮，除去硬脑膜和头盖骨，小心分离出完整的脑组织，用冰冷的生理盐水冲洗，以除 去附着的血液。用滤纸吸干水分后称重，计算脑湿重占体重的比例(如表2)。然后置一80℃冰箱中 存放。 表2 巴戟天水提液对小鼠脑湿重指数的影响(坍P口胛虹矾门=8) 注：与空白对照组比较物0．05，8切0．0l 2．4对模型小鼠单胺类神经递质的影响 2．4．1色谱条件 l unaC C 色谱柱：Phenomenex18(150×4．6n瑚，5岫)，Phenomenex18预柱(KJO一4282， 测电压：350mV、700mV；进样量10止。 2．4．2溶液的制备 2．4．2．1蛋白沉淀液的制备 存放，作为蛋白沉淀剂的工作液。 2．4．2．2混合对照品溶液的制备 得质量浓度约为500嵋·mL。1的对照储备液。取以上四种储备液各200¨L置同一2ml容量瓶中， 0．1mol·L‘1高氯酸溶液加至刻度，混匀，即得。 2．4．2．3样品溶液的制备【17，8】 取“2．3”项下冰冻的脑组织，放入预冷的玻璃匀浆器中，加入一定量预冷的0．1moltL’1高氯酸溶 液做蛋白沉淀剂，转动杆的空槽里装入预冷的冰水，上下转动充分研磨使组织匀浆化。 将研磨好的组织浆液转入离心管中，涡旋混匀后置高速冷冻离心机中4℃离心10min(12000 r·“n-1)，离心后的上清液先过O．22um微孔滤膜，然后用3K超滤管再次离心，收集滤液于高效 液相进样瓶中，备用一J。 钿’帅N撇■跚脚∞舳嘲蝴嘲№删晰嘲Plo。喇哗利糊吣 蔼燕 一 ”2五垣瓣硬葫礤叠芒jK蠢釜茜糯ii蒿审菊葭关酥祷翰蔷潦每采讲讨会 各实验组小鼠脑组织照上述处理后，与“2．4．2．2”项下各对照品及混合对照品分别注入高效液相 色谱仪以上述条件进行电化学检测，记录结果，计算各组脑组织样品的平均含量(见表3)。 表3 巴戟天水提液对小鼠脑中单胺类神经递质含量的影响(聊e口胜，以门=8) 注：与空白对照组比较切0．05，4印0．01 3讨论 3．1对负重游泳时间的影响 结果显示，巴戟天水提液低、中及高剂量组均能显著提高自然衰老小鼠负重游泳时间(PO．01)， 且剂量越高，小鼠负重游泳时间越长。巴戟天水提液对生物体耐力的提高有很大作用，是一种很 好的助力剂，巴戟天水提液具有明显抗疲劳效果。 3．2脑湿重指数的意义 巴戟天水提液低剂量组能明显提高自然衰老小鼠脑湿重指数(氏0．05)，而中高剂量组无明 显效果(P0．05)，说明巴戟天对自然衰老小鼠脑的退化具有保护作用，而且与剂量有关系，相 应作用机制及最佳剂量仍需继续研究。 3．3单胺类神经递质的检测意义 单胺类神经递质是哺乳动物和人类中枢神经重要的信息传递物质，研究单胺类神经递质及其代 谢产物在生物体内浓度的变化对疾病的诊断治疗和药物的作用机理研究都具有重要意义。脑内多 种单胺类神经递质之间可以相互转化，此类神经递质一般不稳定，因此对样品的处理和贮存应在 低温下进行。 3．4单胺类神经递质与记忆 许多学者对脑记忆机制做了大量研究，认为脑内神经递质NE、DA的含量升高，能改善学习记 忆功能，反之，5一HT的升高能阻抑记忆过程。本实验结果显示，连续灌胃给药巴戟天水提液后， 三个剂量组的大鼠脑组织中NE、E、DA的含量均升高，且与剂量呈现明显的趋势关系；而5．HT的 含量则均降低，但低剂量组效果较中高剂量组明显。 3．5单胺类神经递质与抑郁症 已发现异烟酰异丙肼和丙咪嗪均具有振奋情绪、缓解抑郁的作用，并被证明能够提高5一羟色胺 (5_HT)和去甲。肾上腺素(NE)在细胞外液中的浓度，作用机制是抑制其分解代谢酶的活性或阻