参杖颗粒对大鼠实验性肝损伤IL-10、IL-12+的影响.pdfVIP

第三组为中药小剂量组；第四组为参杖颗粒中剂量组。 2.2 造模方法 采用卡介苗 （BCG ）加脂多糖 （LPS ）建立实验性肝损伤大鼠模型[1][2]。 注射 LPS2 小时后，取模型组大鼠，脱颈处死取其肝脏标本，观察病理切片。肝 组织出现典型的灶性坏死和大量炎细胞浸润，示造模成功。 2.4 给药处理 实验第一天除正常组外，其余组大鼠均腹腔注射 BCG8mg （约6 ×100 个活菌）。从第一天起，中药中、小剂量组开始给药，中药剂量按人与动物体表 面积换算，计算出小剂量组为 1ml/kg，中剂量组为 2ml/kg ，灌胃，每天一次。 正常组、模型组灌服生理盐水 5ml/kg，每天一次。第 12 天上午 8 时 30 分给药， 下午 3 时 30 分除正常组外所有大鼠腹腔注射 LPS （30ug/kg 体重）。下午5 时 30 分开始摘眼球取血，后脱颈椎处死，取肝右叶以 4%多聚甲醛固定，分离血清， 于-20℃冰箱中冻存待检。 2.5 观察项目与方法 2.5.1 一般情况：观察大鼠体重、精神、运动、饮食、皮毛色泽等情况。 2.5.2 血清 IL-10 、IL-12 水平测定：采用 ELISA 法，按试剂说明书操作。 2.6 数据统计与处理方法 计量资料以 X ±S 表示，组间比较用方差齐性分析及 t 检验。 二.实验结果 1 一般情况 正常组大鼠活泼喜动，眼睛鲜红而有精神，进食好，毛浓密光亮。模 型组大鼠随着实验进行变得不喜欢运动，萎靡不振，弓背喜卧，进食欠佳，毛稀 疏而干、粗乱蓬松，模型组死亡二只大鼠。中药中、小剂量组未见明显变化。 2 各组大鼠肝脏形态及病理学观察 2.1 肉眼观察 模型组大鼠肝脏形态体积明显增大，包膜紧，色较苍白，混浊无光泽； 各治疗组肝脏形态学上变化不大，色泽基本正常；正常组大鼠肝脏呈暗红色，未 见异常改变。 2.2 肝脏病理形态学改变 正常组：大鼠肝细胞索以中央静脉为中心向四周呈放射状排列，肝小 叶结构清晰。肝细胞核大而圆，核膜清晰，核仁明显，胞质丰富。在汇管区无炎 细胞浸润，结构清晰可见。 模型组：大鼠肝细胞呈弥漫性浊肝，伴随有片状坏死，在汇管区及小 叶周边可见充血和大量炎细胞浸润。 中药中、小剂量组：大鼠肝细胞无浊肿，偶伴有点状坏死，在汇管区 少许炎细胞浸润。 各组大鼠血清 IL-10 、IL-12 检测结果( x ±s ) 组别（n ） IL-10 (pg/ml) IL-12 (pg/ml) 正常组（10） 298 ±57※ 19.92 ±5.67※ 模型组（8 ） 2602 ±470▲ 47.02 ±4.48▲ 中药小剂量（10） 1781 ±241 ※▲ 37.82 ±4.28 ※▲ 中药中剂量（10） 1140 ±124※▲ 29.44 ±5.19※▲ 注：与模型组比较，※P ＜0.01 ；与正常组比较，▲P ＜0.05 ； 三、讨 论 通过对实验动物一般情况的观察，如体重、运动、饮食、皮毛色泽，可 从总体上了解实验动物的机能状态。IL-12 是比较强的 NK 细胞激活因子，能够 活化巨噬细胞，增强 CD8+T 细胞的杀伤功能，促进 CD4+THO 细胞分化为 TH1 细胞[3][7]。IL-10 是一种很强的抗炎性细胞因子，主要由 Th2 细胞产生[4][5]，因 此检测 IL-10 和 IL-12 水平可了解机体的免疫状态。另外，病理学改变是病毒性 肝炎肝损伤的一个重要特征，如肝细胞变性、坏死、炎细胞浸润等，如实地反映 并记录了病理变化，从而通过比较模型组与治疗组的病理切片，能够验证参杖颗 粒的防治作用。 依据温病“伏气学说”之“毒伏肝络”理论，慢性肝病尤其是肝纤维化是 “毒邪内伏肝络日久”之结果[5][6]，参杖颗粒即以此而立法组方，其功效健脾补 肾，清热化湿解毒、活血通络。参杖颗