虎金颗粒对肝纤维化大鼠I、Ш型胶原及TIMP-1+表达的影响.pdfVIP

  Effects of Hujin Granules on Type I, Ш Collagens and TIMP-1 in Hepatic Fibrosis in  Rats            Shi Xuguang, Huang Manting, Huang Zhaosheng, Wu Meiyin  （Guangzhou Univetsity of Chinese Medicine , Guangzhou 510006 Guangdong,China）  【Abstract】Abjective:tostudytheeffectsofHujinGranulesontheproductionof collagenI,Шandtissueinhibitorofmetalloproteinase1(TIMP-1)inImmunohepatic fibrosisinrats.Methods:Modelswithimmunohepaticfibrosiswereinducedbyporcine serum,andtheHJGgroupwastreatedsimultaneouslywithHJG.Theexpressionsof collagenI,ШandTIMP-1inliverwereobservedbyimmunohistochemistry(IHC)and Reverse TranscriptasePolymerase chain Reaction(RT-PCR), respectively. Results: The productionoftypeI,ШcollagenswasreducedinHJGgroupcomparedwiththemodel group(P0.01).ExpressionofTIMP-1mRNAwasreducedcomparedwiththemodel group(P0.01）.Conclusions:HJGtreatmentreducesthesynthesisofhepatictypeI,Ш collagensandTIMP-1inthefibroticliverinducedbyporcineserum,andattenuateshepatic fibrosis. 【Keywords】HujinGranules;hepaticfibrosis;collagen;immunohistochemistry 虎金颗粒(HujinGranules,HJG)是临床上治疗肝纤维化的经验方，该方由虎杖、郁 金、三七、泽泻、山楂、灵芝六味药所组成，具有清热祛湿，益气疏肝，活血化瘀功效。 以往研究表明，虎金颗粒对免疫损伤性肝纤维化具有明显的治疗作用，表现在其改善肝 [1,2] 纤维化模型肝功能及肝纤四项指标 ，抑制肝星状细胞增殖等方面 。本研究继续在复 制猪血清诱导免疫性肝纤维化模型的基础上，观察HJG对Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白及TIMP-1 表达的影响,从而探讨HJG抗肝纤维化作用的机制。 1材料与方法  1.1实验动物 雄性SD大鼠40只，SPF级，体质重120-140g，由广州中医药大学实验动物中 心提供（动物合格证：2003A010）。 1.2主要药品与试剂 虎金颗粒（虎杖、郁金、泽泻、三七、山楂、灵芝等组成）由广州中医药大学中药 -1 浓度的混悬液，放 研究所提供（批号：030604），使用前用蒸馏水配制成0.24g·mL 置于4℃冰箱保存。秋水仙碱（Colchicine），为昆明制药集团股份有限公司产品，批号 002509。使用前用双蒸水配成10ug/ml的浓度。猪血清：从广州市加禾屠宰厂取新鲜 猪血，静置数小时后取猪血上清部分，3500rpm离心10min，回收上清，即得猪血清， 用0.45μm微孔滤膜过滤除菌，分装后于-20℃冷冻结冰，后转-70℃保存备用。一抗 (collagenⅠ，collagenⅢ均为兔抗大鼠多克隆抗体)，二抗（生物素化羊抗兔IgG）