深海真菌及其活性次级代谢产物相关初步的研究.pdfVIP

第十一届全国中药和天然药物学术研讨会 中国沈阳 2011．10 深海真菌及其活性次级代谢产物相关初步研究 华威，陈修文，崔香，董源，李长伟，崔承彬· 军事医学科学院毒物药物研究所，北京 微生物产物是新颖结构药物先导化合物的一个重要来源。随着研究范围的不断拓展，深海来源 微生物活性产物的研究越来越受到人们关注。深海特殊的生存环境往往会使生存其中的微生物通过 长期适应周围苛刻生存环境的演化过程进化具备了独特代谢途径，因而极有可能代谢产生有别于普 通环境微生物产物的新颖结构活性化合物。鉴于对深海微生物的研究远不如普通环境微生物那么广 泛和深入，人们怀着发现新颖结构活性化合物的热切期望和浓厚兴趣，对深海微生物的研究倾注着 极大的热情。深海微生物通常适应了所在海域高压、高盐、乏氧、缺光、寡营养等综合环境，但所 处海域不同深度的生存条件往往干差万别。在普通实验室通常很难采用与深海环境相同条件进行培 养。因此，用深海微生物如何在普通培养条件下激发其次级代谢潜能，并从中发现结构新颖活性产 物，是值得研究的课题。此外，由于采集、分离等方面的技术难度，深海微生物目前可以说是稀有 菌株，系统考察和充分挖掘其代谢潜能，对于稀缺资源的开发利用也具有重要意义。鉴于此，我们 对深海来源真菌开展了相关研究。 我们采用MTT法和纸片法，对16株深海来源真菌发酵产物进行了抗肿瘤、抗真菌活性筛选。 抗肿瘤活性测试结果显示，其中12株对K562细胞呈显著抑制活性，2株呈中等强度抑制活性，其 albicansATCC terreus 对受试白色念珠菌Candida W-1呈现抑制活性， 10231和致病真菌Aspergillus 菌株，开展了活性产物的研究工作。目前，已分离得到6个化合物，其中3个分别鉴定为过氧麦角 甾醇、麦角甾醇和麦角甾酮，其余化合物的结构解析工作正在进行。该两株发酵物中仍有多种其他 结构类型的抗肿瘤活性产物，进一步分离纯化工作也在进行中。此外，对既无抗肿瘤活性也无抗真 菌作用的深海真菌ZBY-3，我们进行了超声波介导的新霉素抗性筛选，并获得了15株突变株。经对 该15株突变株发酵样品的活性筛选，发现所有突变株样品对受试白色念珠菌和致病真菌W-1均无 抗菌作用，但2株突变株样品却显示出显著的抗肿瘤活性。该2株突变株新产抗肿瘤活性产物目前 亦已着手开展分离纯化工作。在上述研究过程中我们发现，这些菌株产生活性产物的次级代谢功能 极易受到培养基组成交化的影响，培养基组成仅由淡水到海水的变化，就使得发酵产物的活性发生 显著增强、减弱或甚至消失。 通过上述研究我们体会到，从深海来源真菌野生菌株中筛选活性菌株的阳性率很高，是可高效 获得活性菌株的较好原始资源，有值得深入研究的潜在价值。但是，这些菌株由于脱离了其原来长 期赖以生存的深海环境，在储藏、继代和培养过程中代谢稳定性呈现较大波动，提示对深海真菌应 予以充分驯化并注意优化培养条件，以使其能够稳定重现活性产物的代谢产生。同时，最好使用多 种活性筛选模型，扩大活性筛选范围，以尽可能避免单一筛选造成的菌株资源浪费。在本次学术会 议上，我们将主要交流报道对深海真菌的研究结果、新近进展和初步研究体会。 关键词：深海真菌；抗肿瘤：抗真菌；抗性筛选；活性产物 was No．811 ·基金项目：Thiswork the fromtheNationalNaturalScience supporu，dby grants Foundation(grant72976, 102 aad 3097363l30472079，3017land National ,theHi曲TechnologyResearchDevelopment National and Pr