来源于青霉XMZ-9两个低温脂肪酶的基因克隆、原核表达和性质测定.pdfVIP

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2015-08-03 发布于安徽
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来源于青霉XMZ-9两个低温脂肪酶的基因克隆、原核表达和性质测定.pdf

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郑小梅等／来源于青霉KMZ-9两个低温寤肪酶的基因克窿、最核表达与性质测定生物工程学报 ChineseJournalof 25，2012．28(4)：488—497 BiotechnoIOgy April reserved @2012ChinJBiotech．All http：融ournals．im．ac．cn／cjbcn rights 来源于青霉XMZ．9两个低温脂肪酶的基因克隆、原核表达与性质测定郑小梅，伍宁丰，范云六 1 中国农业科学院生物技术研究所，北京10008 郑小梅，伍宁丰，范云六．来源予青霉XMZ一9两个低温脂肪酶的基因克隆、原核表达与性质测定．生物工程学报，2012， 28(4)：488—497． and two fromPenicillium NF,FanYL．Gene characterizationof ZhengXM，Wu cloning，expression cold·adaptedlipases sp． 1 XMZ·9．ChinJBiotech，202，28(4)：488—497．摘要：低温脂肪酶在低温条件下仍具有较高活性，在食品添加剂、洗涤添加剂及有机合成等产业具有非常独特的应用前景。从低温菌株中分离低温脂肪酶基因是开发新的低温脂肪酶的有效手段．首先利用油脂同化平板与三丁酸甘油酯．维多利亚蓝平板从冰川土样中筛选分离获得一株具有较高脂肪酶活性的真菌，18SrDNA鉴定其属于青霉属，命名为Penicillium sp．XMZ一9。根据真菌脂肪酶多序列比对获得的保守区，设计简并引物，利用降落PCR与染色体步移的方法从Penicillium sp．XMZ．9中克隆到2个完整的脂肪酶基因，分别记为LipA 014 232 122 与￡功B。￡咖A全长l bp，无内含子，编码337个氨基酸．而￡护B全长lbp，cDNA长lbp，含 coil 出低温适应性：LipB则大部分表达为可溶性蛋白，Ni．亲和层析柱纯化后，其亦具有低温脂肪酶活性．青霉菌株XMZ一9的获得与低温脂肪酶的克隆表达研究，为研究低温菌株与低温酶的适冷机制提供了宝贵的资源，也为进一步开发利用低温脂肪酶奠定了基础．关键词：青霉菌，脂肪酶，基因克隆，包涵体，体外复性 Received：October 21，2012：Accepted：January12．2012 NaturalScienceFoundation Supportedby：National ofChina(No． Wu．Tel／Fax：+86-10E-mail：期m埏岫．nct．CD Correspondingauthor：Nmgfeng 国家自然科学基金(No资助。郑小梅尊／来源于膏■XMZ-9两个低温脂肪酶的基因克瞻、原核衷达与性质测定 and Gene characterizationoftwo