基质金属蛋白酶-2在盐型高血压大鼠心脏中的表达及不同种类降压药物的影响.pdfVIP

维普资讯 m曩Ⅱ字 赫 。2005。15(4)：17～21 ⑥ 2005 CItlNESEJOURNALOFMICROCIRCU~TION 基质金属蛋白酶．2在盐型高血压大鼠心脏中 的表达及不同种类降压药物的影响 王学忠 章 萍 王岳松 洪小苏2陈建昌2焦 阳2 [中图分类号] R544．15 [文献标识码] A [文章编号] 1005—1740(2005)04—0017—05 用波生坦 (瑞士 Actelion制药有 限公司惠赠)100 —固一冀展 。 mg／kg、氨氯地平 (北京赛科特药业公司惠赠)30 ，并可能导致与微循环有关的靶器官损害， mg／kg和雷米谱利(由AstraZeneca惠赠)1．5mg／kg 如肾脏病变、腔隙性脑梗塞以及微血管性心绞痛 灌胃，1次 ／天，持续 5周。实验终点，通过下腔静 等-lJ。因此，针对改善微小血管病变的降压治疗， 脉，分别采取 5组大鼠静脉血 2ml，注入含 10％ 有可能改善微循环，减轻或延缓靶器官的损害，并成 EDTA-Na230,ul和抑肽酶40肚l试管中，混匀，分离 为高血压治疗一新的靶点。但针对高血压微小血管 血浆，用于测定内皮素．1(ET-1)。之后，处死大鼠， 病变的分子机制研究较少。有报道基质金属蛋白酶 迅速摘取心脏，4℃生理盐水洗净吸干，称重，去除心 。 2(M 。2)参与高血压心脏和主动脉重塑 2。下调 房和右心室，保留左心室及室间隔，称左心室重量 MMP．2表达能防止心脏扩张，保护心肌收缩力，减轻 (LVW)，取垂直于长轴中1／3组织，中性福尔马林 心肌纤维化-3J。但其与微小血管病变间关系未见报 固定，石蜡包埋，留行胶原和免疫组化检测。余下心 道。本研究旨在观察脱氧皮质酮( )．盐型高血 脏部分行O．C．T包埋 ，液氮中速冻，一80℃保存留 压大鼠(D})及不同种类降压药物干预下大鼠心脏 行冰冻切片；部分心脏内膜下组织即刻置于液氮罐 MMP-2／基质金属蛋 白酶．2特异性组织抑制 因子 中保存，留行RT-PCR检测。 (TⅡV 2)表达和微小血管密度变化，评价MMP．2／ 1．2 主要试剂 TIMP-2表达与微小血管病变间关系，并探讨 MMP． DOCA购于Sigma公司；ET．1放免试剂盒由解 2／TIMP-2在微小血管重塑中的作用和意义。 放军总医院科技开发中心放免所提供；层粘素多克 隆抗体 (一抗)、平滑肌 a一肌动蛋 白单克隆抗体 (一 1 材料与方法 抗)购于武汉博士德公司；S-P试剂盒购于福州迈新 1．1 动物模型及分组 公司；MMP．2和TIMP．2单克隆抗体由北京中山公 清洁级雄性SD大鼠30只，体重 150g--180g， 司提供；各种RT．PCR试剂为BBI公司产品。 由苏州大学实验动物中心提供。DHR模型制备，简 1．3 血压和血浆ET_1浓度测定 述如下：10％水合氯醛腹腔麻醉，切去左侧肾脏，腹 采用 日本产Soft型大鼠尾压心率测定仪测量 腔注射青霉素3天。术后一周，随机分成五组(均 大鼠尾动脉收缩血压，术前、术后每周各测一次直至 =6)，其中一组为对照组，饮 自来水；另四组分别为 实验结束。血浆 ET-1浓度采用放免法测定，严格 模型组、波生坦组、氨氯地平组和雷米普利组，四组 按说明书操作。 均予DOCA皮下注射 (50mg／kg)，每周一次，同时 1．4 左心室微小动脉和毛细血管密度测量 饲 以含 1％氯化钠及0．2％氯化钾饮水，连续5周 。 采用S-P法。操作方法：切片(厚度 4z／m，每个 与此同时，波生坦组、氨氯地平组