TRAF6在人PBMC来源的树突状细胞成熟中的作用.pdfVIP

国痘理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2011，27(9)：1767—1771 · 1767 · [文章编号] 1000—4718(2011)09—1767—05 TRAF6在人 PBMC来源的树突状细胞成熟中的作用 5,1 璐 ， 李 琳 ， 闵 军 ， 王 捷。， 伍 衡 ， 曾育杰 ， 陈 双 ， 褚忠华 (中山大学孙逸仙纪念医院 胃肠外科 ，妇产科，。肝胆外科 ，广东 广州 510120) [摘 要] 目的：探讨肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)在不同成熟度树突状细胞(DCs)中的表达及其 对 DCs免疫刺激活性的影响。方法：重组人粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子(rhGM—CSF)和重组人白细胞介素4 (IL一4)体外诱导的人外周血单个核细胞来源的DCs，经TN1d一0、【LPS和细胞因子鸡尾酒法诱导成熟，分别以流式 细胞术、ELISA和混合淋巴细胞反应 (MLR)检测DCs的表面标志、IL一12分泌和刺激淋巴细胞增殖能力。Western blotting和real—timePCR分别检测各组TRAF6蛋白水平及mRNA的表达。结果：各组DCs均表达TRAF6，成熟状 态最佳的鸡尾酒诱导下 DCs的TRAF6蛋白表达最高。高表达TRAF6的DCs可促进 IL一12的分泌，增强刺激淋巴 细胞增殖的能力。结论 ：TRAF6是调节DCs激活和成熟的关键因素。 [关键词] 树突细胞；肿瘤坏死因子受体相关因子；细胞因子 [中图分类号】 R363 [文献标识码] A doi：l0．3969／j．issn．1000二4718．2011．09．020 R0le0fTRAFl6inmaturationofhumanPBMC —deriveddendriticcells LIU Lu ，LILin。 ， MINJun，WANGJie，WUHeng，ZENGYu—jie，CHENShuang， CHUZhong—hua (DepartmentofGastrointestinalSurgery,2DepartmentofObstetricsandGynecology3DepartmentofHepatobiliarySurgery， SunYat—senMemorialHospital，SunYat—senUnivemity，Guangzhou510120，China．E—mail：CHUgO09@163．com) [ABSTRACT] AIM：Toinvestigatetheimmunologicaleffectoftumornecrosisfactorreceptor—associatedfactor6 (TRAF6)onthematurationofdendriticcellsinvitro．METHODS：Thehumanperipheralbloodmononuclearcell(PB- MC)一derivefldendriticcells(DCs)，inducedbyrecombinedhumangranulocytemacrophagecolony—stimulatingfactor (GM—csv)andinterleukin(IL)一4，werestimulatedtomaturewithTNF一 ，LPSorcocktailofcytokines(TNF一 ， IL一6，IL一1BandPGE2)．Thecellsurfacemarkers，T—cellstimulatoryproliferationcapacityandIL一12p4Oproduc— tionofhteDCsweredeterminedbythemethodsofflowcytometry，ELISAandmixedlymphocytereation(MLR)，respec— tively．Th emRNA expressionofTRAF6wasdetectedbyreal—timePCR．RESULTS：TheexpressionofTRAF6wasob- servedinallgroups，whichincoc