蛋白偶联受体56基因敲除抑制少突胶质前体细胞成熟.pdfVIP

· 454 · ChineseJournalofPathophvsiolo~ 2014，3o(3)：454-459 [文章编号] 1000-4718(2014)03—0454—06 G蛋白偶联受体 56基因敲除抑制 少突胶质前体细胞成熟 邓医宇， 朱高峰， 方 明， 曾文新， 蒋文新， 曾红科 (广东省人民医院，广东省医学科学院急危重症医学部，广东 广州510080) [摘 要] 目的：探讨G蛋白偶联受体56(GPR56)基因敲除对小 鼠脑胼胝体内轴突髓鞘化和少突胶质前体 细胞(OPCs)成熟的影响。方法：筛选出GPR56基因杂合型(GPR56 一)和敲除型(GPR56 一)小 鼠36只，分为 GPR56+／一和GPR56I／一组 ，每组 18只。每组根据小鼠出生后时间分为出生后7d(F7)、14d(P14)、21d(P21)和28 d(P28)4个亚组。应用FhoroMyelin染色观察P14、P21和P28GPR56“和 GPR56 一小鼠脑胼胝体内髓鞘形成。 用电镜观察 P28GPR56 一和GPR56-／一小鼠胼胝体内轴突髓鞘化 ，比较髓鞘的厚度。用荧光免疫组化染色观察P7 GPR56 一和GPR56I／一小鼠胼胝体内血小板源性生长因子0【受体阳性(PDGF-仅R )细胞(即OPCs)的数量。用原 位杂交监测P28GPR56 一和GPR56I／一小鼠胼胝体内髓鞘蛋 白脂质蛋白阳性(PLP )细胞数。用出生后 1d的 GPR56 一和GPR56√一小鼠脑皮质做体外OPCs培养并诱导其分化成熟 ，观察 pro-oligodendroblast、immatureoligo- dendrocyte和matureoligodendrocyte阶段 04 细胞百分 比。结果：与 GPR56 一小 鼠比较 ，在 P14、P21和 P28 GPR56I／一小鼠脑胼胝体中髓鞘的形成明显减少。电镜见P28GPR56 一小鼠脑胼胝体内髓鞘化轴突的数量明显减 少，髓鞘 g-ratio值变大，髓鞘厚度变薄。荧光免疫组化和原位杂交结果显示P7GPR56 一和GPR56 一小鼠胼胝体 内PDGF．aR 细胞数量无差异，但 P28GPR56 一小鼠胼胝体内PLP细胞数明显多于P28GPR56 一小鼠。体外细 胞培养结果显示在pro．oligodendroblast阶段GPR56 一04 细胞百分比明显多于GPR56 一04 细胞，在 immature oligodendrocyte和matureoligodendrocyte阶段 GPR56 一o4 细胞百分 比明显少于 GPR56“一04 细胞。结论： GPR56蛋白可能参与了脑白质轴突髓鞘化和OPCs的成熟。 [关键词] G蛋白偶联受体56；胼胝体；少突胶质细胞 ；髓鞘化 [中图分类号] R363 [文献标志码】 A doi：10．3969／j．issn．1000-4718．2014．03．013 KnockoutofGPR56geneinhibitsmaturationofoligodendrocyteprogeni- torcells ， DENG Yi-yu，ZHU Gao-feng，FANG Ming，ZENG Wen-xin，JIANG Wen-xin，ZENG Hong-ke (EmergencyandCriticalCareDepartment，GuangdongGeneralHospital，GuangdongAcademyofMedcialSciences，Guang- zhou510080，China．E—mail：zenghongke@ ．163．corn) [ABSTRACT] AIM：ToexploretheeffectofG—protein-coupledprotein56(GPR56)geneknockoutonaxonalmy· elinationandthemat