索拉非尼联合柔红霉素对白血病K562细胞的抑制作用.pdfVIP

· l356· 中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2010，26(7)：1356—1361 [文章编号] 1000-4718(2010)07—1356—06 索拉非尼联合柔红霉素对 白血病 K562 细胞的抑制作用冰 肖若芝 ·， 何程明 ， 王立琳 ， 阮星星 ， 陈 琰 ， 林东军 ’ (中山大学 附属第三医院血液科，血液病研究所 ，广东 广州510630) [摘 要] 目的：探讨小分子Raf激酶抑制剂索拉非尼 (sorafenib)联合柔红霉素(DNR)对白血病细胞K562 及U937的抑制作用及可能的分子机制。方法：MTY法测定索拉非尼和柔红霉素单独作用于K562和U937细胞的 抑制率及 DNRIC。联合不同浓度索拉非尼作用于 K562及 15937的联合抑制率；流式细胞AnnexinV／PI法测定单 药及联合用药后K562细胞的凋亡率以及Hoechst33258染色法观察单药及联合作用后细胞凋亡形态的改变；West— ernblotting法测定索拉非尼、DNR及U0126对K562及U937P—ERK1／2的影响；根据金氏方程证明2种药物联合 抑制率及凋亡是否有协同作用。结果：MqT法测定索拉非尼联合 DNR对 K562及 U937均有协同抑制作用 (q 1．15，P0．01)；流式细胞AnnexinV／PI和 Hoechst33258染色法 ，均证明索拉非尼联合柔红霉素能联合诱导K562 细胞凋亡 (q1．15，P0．05)，两者有明显的一致性；K562细胞的基础pERK1／2蛋白水平明显高于U937细胞 (P 0．01)，索拉非尼和U0126都能够显著抑制K562细胞P—ERK1／2水平；U0126联合DNR存在协同抑制 K562细 胞的作用。结论：索拉非尼联合DNR作用于白血病细胞K562、U937存在协同抑制及凋亡诱导作用；DNR对U937 的抑制作用明显高于K562；索拉非尼对K562的敏感性高于U937细胞 ；索拉非尼可能通过下调P—ERK1／2水平增 加柔红霉素抗 白血病细胞的效应。 [关键词] 索拉非尼 ；柔红霉素；白血病；Raf／MEK／ERK通路 [中图分类号] R733．7 [文献标识码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2010．07．022 Combinationofsorafeniband daunorubicinhasantileukemicactivityon K562cells XIAO Ruo—zhi ，HE Cheng—ming ，WANG Li—lin ，RUAN Xing—xing ，CHEN Yanl，．LINDong—junl (DepartmentofHematology，TheThirdAffiliatedHospital，InstituteofHematology，SunYut—sel~University，Guangzhou 5l0630，China．E—ma il：ruozhi _ xiao@yahoo．co／z／) [ABSTRACT] AIM：Toinvestigatethesynergeticinhibitoryeffectofsorafenibanddaunorubicin(DNR)onK562 andU937cells．METHODS：Theinhibitoryrateofsorafenibordaunorubieinalone，andthecombinedinhibitory rateof sorafenibandIC1odaunorubicinweremeasuredbyMTTassay．Apoptoticrateofsingledrugorcombinationwasassessedby flowcytometry(AnnexinV／PIstaining)nadHoechst33258stainingassay．P—ERK1／2level