转染Akt1基因对缺血再灌注大鼠心肌线粒体通透性转换的影响.pdfVIP

· 8O · 坚国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2010，26(1)：80—85 [文章编号] 1000—4718(2010)01—0080—06 转染Aktl基因对缺血再灌注大鼠心肌线粒 体通透性转换的影响 王 静 ， 李东野 ， 夏 勇 ， 罗园媛 ，‘ 陈 丹 ， 潘德锋 ， 朱 红 ， 张卓琦 ， 徐通达 (徐州医学院 心血管病研究所，附属医院心内科 ，江苏 徐州221006) [摘 要] 目的：研究Aktl基因对缺血再灌注(I／R)损伤心肌细胞的保护作用，并探讨Aktl基因对心肌 I／R 损伤时线粒体通透性转换(MPT)功能的影响。方法：使用结扎／松解左冠状动脉前降支法，结扎冠状动脉前降支 30min，再灌注120min，建立大鼠在体心肌 I／R损伤模型。加 只雄性SD大鼠随机分为5组，每组8只：假手术对照 组(control组)、心肌缺血／再灌注组(I／R组)、转 Aktl基 因+I／R组(Ad—gene组)、空载体+I／R组(Ad—blank 组)、转 Aktl基因+I／R+Akt抑制剂组(Ad—inhibitor组)。Ad—gene组术前48h开胸心肌内直接分点注射脂质 体Aktl质粒复合物，control组和I／R组分别注射同等体积磷酸盐缓冲液 (PBS)，Ad—blank组注射等体积脂质体， Ad—inhibitor组注射等体积脂质体 Aktl质粒 LY294002混合物。观察转染Aktl基因对大鼠I／R心脏乳酸脱氢酶 (LDH)和肌酸激酶 (CK)释放、心肌细胞凋亡、Aktl表达、线粒体和胞浆内细胞色素C(Cyc—C)表达以及MPT的影 响。结果：Control组可见Aktl表达，但明显低于其余各组；与control组相比较，其余各组心肌细胞凋亡指数(AI)、 LDH和CK均增高；与control组相比较，其余各组 Cyc—C较胞浆表达增加而线粒体内表达减少。Ad—gene组 Aktl蛋 白表达较 control组、I／R组、Ad—blnak组及Ad—inhibitor组均增加；Ad—gene组 AI、LDH和 CK较 I／R组、 Ad—blank组及Ad—inhibitor组均显著减少，但仍高于control组；Ad—gene组 Cyc—C较 I／R组、Ad—blank组以及 Ad—inhibitor组胞浆内表达减少而线粒体内表达增加；Ad—gene组较IR组、Ad—blnak组和Ad—inhibitor组在540 nm处吸光度值增高，但明显低于control组。I／R组、Ad—blank组以及 Ad—inhibitor组 Aktl、Cyc—C、AI、LDH和 CK以及在540 nm处吸光度值比较均无显著差异。结论：转染Aktl基因对I／R损伤心肌细胞具有保护作用，该作 用可能与Aktl抑制 I／R诱导的心肌线粒体膜通透性转换，从而保护线粒体的功能有关。 [关键词] 基因，Aktl；再灌注损伤；线粒体通透性转换 [中图分类号] R322 [文献标识码] A EffectofAktlgenetransfectiononmitochondrialpermeabilitytransition aftermyocardiuin ischemia—-reperfusioninrat WANGJing，LIDong—ye，XIA Yong ，LUOYuan—yuan ，CHEN Dan ，PAN De— feng2 ZHU Hong ，ZHANG Zhuo—ql一，XUTong—d ， (InstituteofCardiovascularDiseases， TheAffiliatedHospital，XuzhouMedicalCollege，Xuzhou221006，China．E— mail：Ldy@xzmc．edu．cn) [ABSTRACT] AIM：ToinvestigatetheeffectsofAktlgenetrnasfectionintomyocardiumafterischemia—reperfu— sion(I／R)on