小鼠显微操作针制作技术.pdfVIP

山西医科大学学报 (JShanxiMedUniv)2011年6月，42 (6 ·52l· 小鼠显微操作针的制作技术 郭永昌， 刘田福 ， 张引红 (山西医科：学实验动物中心， 太原 030001； 通讯作者，E-mail：ykdltf@yahoo coin．en) 摘要： 目的 探讨转基因小鼠制作 巾显微注射时所用移卯管、持卵针和注射针的最佳制作方案。 方法 通过酒精灯烧制 和手拉以及通过 P一97拉针仪设置不同的参数将薄壁硼硅玻璃管拉制成不同口径的移卵管 、持卵针和注射针。 结果 按本 方案制作的移卵针，持卵针和注射针用于小鼠受精卵的显微注射，实验过程顺利，效果非常好。 结论 该方法适用于小鼠 受精卵显微注射的移卵管、持卵针和注射针制作。 关键词 显微操作； 移卵管； 固定针； 注射针 中图分类号： 1133—33 文献标志码 ：A 文章编号： 1007—6611(2011)06—0521—02 DOI：10．3969／J．ISSN．1007—6611．2011．06．023 Studyontechnologyofmakingpipettesformicroinjection GUOYong—chang，LIUTian—fLl，ZHANGYin—hong(ExperimentalAnimalCenter，ShanxiMedicalUniversit)，‘Taiyuan030001，Chi ；Correspondingauthor，E—mail：ykdltf@yahoo．con；．cn) Abstract： 0 ctive Toinvestigatesuitablemethodtomaketheholdingpipettes，injectionpipettesandpipettesforembryohandling duringtheproductionoftransgenicmice． Methods Borosilieateglasstubeswereburnedbyalcohollampburnerandpulledbyhand orindifferentparametersofP-97pullertomakethedifferentinnerandouterdiametersofpipettes． Results Holdingpipettes，injec— tionpipettesandpipettesforembryohandlinghadgoodeffectofrmieroinjeetionwiththeincreasedsurvivalrateoffertilizedeggs． Conclusion Themethodissuitabletomakepipettesformicroinjeetion． Keywords： micro—manipulation； holdingpipettes； injectionpipettes； pipettesforembryohandling 显微操作技术是制备转基因动物的最霄用的方 缘瞬烧断裂处 ，在 100倍显微镜下观察，切 口应圆滑 法，而显微操作针又是转基因动物制备 ¨』、动物克 而又保持有一定内径。理想的移卯管内径150—200 隆 和嵌合体动物制备 等必备的工具之一。显 m为宜。将毛细玻璃管粗端连于一适当长度的输 微操作针制备的好坏是显微操作的基础，直接影响 液器软管的持针器上，输液器软管另一端接移液器 操作的关键。平整、质量好的针不仅能够提高操作 吸嘴，作为 口控管。构成 “口控管 一塑料软管 一移 效率 ，而且对卵母细胞和胚胎不会有太大 的伤 卯管”的操作系统。可 以在 口控管的吸头 内插入小 害 J。显微注射中胚胎操作涉及移卵管、固定针和 团棉花，既减小虹吸作用也可以起到过滤作用。 注射针的制做 ，制备时需要一定 的耐心，反复试验 ， 1．2 固定针的制作 注射过程中，固定针的主要功 找到最适合的方法和各种针的参数，这样做可 以节 能就是对合子进行固定，要牢固而且动作要轻柔。 约大量的注射时间，可以得到更满意的注射效果，是 理想形状的固定针应是外径 120—140 m