人类GSTP1基因最小启动子的克隆和其转录活性研究X.pdfVIP

现代妇产科进展 2003 年 11 月第 12 卷第 6 期 　Prog Obstet Gynecol ,Nov. 2003 ,Vol. 12 ,No. 6 ·论著· 人类 GSTP1 基因最小启动子的克隆及其转录 活性研究 蔡俐琼 ,王泽华 (华中科技大学同济医学院附属协和医院妇产科 ,武汉 　430022) 　　【摘要】　目的 :克隆编码谷胱甘肽 S转移酶 P1 ( GSTP1) 基因的最小启动子并研究它 在上皮性卵巢癌细胞中的转录活性。方法 : 以人类基因组为模板扩增人类 GSTP1 基因的 最小启动子 ,将启动子分别插入到 p GEMT 载体和荧光素酶报告基因 p GL enhancer 载体 3 中。将重组荧光素酶报告基因系统分别转染顺铂耐药AD6 和顺铂敏感 A2780 细胞 , 比较 启动子在两种细胞中的活性 ; 同时将转染后的AD6 细胞用 H O 处理 ,观察细胞氧化还原 2 2 状态的变化对启动子活性的影响。结果 :报告基因活性测定结果表明 , GSTP1 在耐药 AD6 细胞中启动子表现出比在 A2780 细胞中强的活性 ,在 AD6 细胞中启动子活性经 H O 诱 2 2 导后增高。结论 :成功克隆了 GSTP1 最小启动子 ,在 AD6 细胞中 GSTP1 启动子的功能活 性较强 ,为下一步对多药耐药性卵巢癌进行靶向基因治疗提供了重要依据。 【关键词】　卵巢肿瘤 ;谷胱甘肽 S转移酶 ;启动子 ;荧光素酶报告基因 ( ) 中图分类号:R737. 31 　文献标识码 :A 　文章编号 :1004 - 7379 2003 06 - 0401 - 03 Cloning the minimal promoter of the human GSTP1 gene and research of its transcriptional function. Cai Liqiong , Wang Zehua . Department of Obstetrics and Gynecology , Union Hospital , Tongji Medical College , Huazhong University of Science and Technology , Wuhan 430022 【Abstract 】　Objective :To clone the minimal promoter of the glutathione Stransferase P1 ( GSTP1) gene and study its transcriptional activity of ovarian cancer cells. Methods :The minimal promoter of the human GSTP1 gene was amplified from human genomic DNA by PCR , and then it was subcloned into p GEMT and p GL3enhancer. The luciferase report system were used to transfer cisplatinsensitive A2780 and cisplatinresistant AD6 cells. The luciferase activities