两种人乳腺癌裸鼠移植模型建立.pdfVIP

第十一届中南地区实验动物科技交流会论文集 两种人乳腺癌裸鼠移植模型的建立 * 饶子亮，黄 威，郑佳琳，孙 侠，黄红坤，钟志勇，王 刚 （广东省医学实验动物中心，佛山 528248 ） 【摘要】目的 建立简便的人乳腺癌裸鼠移植模型,并探讨其部分生物学特性。方法 采用 雌激素受体阴性的MDA-MB-231 和SK-BR-3 人乳腺癌细胞株,分别接种于 10 只裸鼠左侧腋窝 7 皮下,移植细胞总数为 1×10 /只。观察肿块生长情况,至 42 天处死荷瘤鼠,切除肿块作病理 切片。结果 MDA-MB-231 接种后第 5 天在接种部位可见结节,成瘤率为 90%(9/10)，接种 42 天肿瘤体积426.6±333.8，瘤重 0.417±0.276，病理学检查为浸润性导管癌；SK-BR-3 接种后第11天在接种部位可见结节,成瘤率为80%(8/10)，接种42天肿瘤体积357.5±246， 瘤重 0.325±0.167，病理学检查为浸润性导管癌。结论 该方法建立的人乳腺癌裸鼠移植 模型,皮下移植方法简单,易于操作,成功率较高,肿瘤可部分保持人乳腺癌生物学特性,为 研究人乳腺癌提供了重要工具。 【关键词】人乳腺癌；裸鼠移植；模型 乳腺癌是一种严重危害妇女健康的恶性肿瘤,其发病率在世界范围内呈上升趋势，居妇 女恶性肿瘤的首位或第2位[1] 。在对其生物学行为的认识及发展新的治疗方法上，乳腺癌动 物模型起着举足轻重的作用[2-4] 。在实践中人们发现，由于乳腺癌细胞株自身的生物学特性 所限，很多人乳腺癌细胞株在小鼠模型上成瘤率很低，大大影响了建模的稳定性和可靠性[5] 。 目前国内报道的乳腺癌模型多数来源于动物或者需要手术，且缺少对人源性乳腺癌模型制作 的报道。本研究的目的是建立简便的人乳腺癌裸鼠移植模型。 1 材料与方法 1.1 实验动物与饲养条件 SPF 级 BALB/c 裸鼠 20 只，雌性，周龄 5-6 周，由广东省医学实验动物中心提供。实 验动物生产许可证号：SCXK （粤）2008-0002 ；合格证号：0025051、0069860 。裸鼠饲养在 广东省医学实验动物中心 SPF 级实验动物室 IVC 系统内，动物实验环境设施合格证号： SYXK （粤）2008-0002 ，室内保持20~25 ℃，湿度40~70 % ，自由饮水、进食，水料充足， SPF 级饲料产自广东省医学实验动物中心。 1.2 细胞 [基金项目] 2009 年广东省医学科研基金(A2009131)。 [作者简介] 饶子亮(1983- )，男，实验师，从事抗肿瘤药物筛选研究。 [通讯作者] 王刚（1966-），男，高级兽医师，从事实验动物和比较医学研究工作，E-mail:gdmlac@。 923 第十一届中南地区实验动物科技交流会论文集 MDA-MB-231 和 SK-BR-3 乳腺癌细胞来源于中科院上海细胞库。 1.3 主要试剂和仪器 RPMI 1640 培养基，GIBCO 公司生产，批号：8110164；胎牛血清：GIBCO 公司生产， 批号：青/链霉素双抗，杭州吉诺生物医药有限公司生产，批号胰 酶，杭州吉诺生物医药有限公司生产，批号 倒置显微镜，日本奥林巴斯产品，型号：CKX41 ；无菌超净台，苏州净化有限公司， 型号：SW-CJ-2FD；恒温CO2孵箱，美国Thermo，型号：311 。 1.4 实验方法 取对数生长期的 MDA-MB-231 和 SK-BR-3 细胞，经胰酶消化后,用 Hank 液清洗 2 次, 再用 1%锥虫蓝染色,在细胞记数板上作细胞记数,并调节使活细胞浓度为 5×107/ml,于裸鼠左 侧腋窝皮下下接种 0.2 ml/只，各接种 10 只。 肿瘤细胞接种后,每天观察肿瘤生长情况,每周 测量肿块的大小。按公式 V=1/2×长×宽×宽,计算肿瘤大小,并绘制生长曲线。第 30 天拉颈处 死荷瘤鼠, 皮下剥离肿瘤称重,记录质地、浸润、血供情况,观察有无粘连,各脏器转移状况,