肾消康对糖尿病大鼠肾组织基因Gna12表达影响.pdfVIP

肾消康对糖尿病大鼠肾组织基因Gnal2表达的影响· 姜德友乔羽 解颖白玉宾王兵陈飞刘春红柳成刚常佳怡高恩宇韩洁茹 黑龙江中医药大学黑龙江哈尔滨150040 摘要t 目的：观察中药复方肾消康对糖尿病肾病大鼠的防治作用及对肾脏基因表达的影响，探讨糖尿病肾病 DN 的发病机制，揭示中药复方肾消康防治DN的作用机理，筛选药效作用靶点，为临床推广应用提供科学依据。方法： 本实验采用链脲佐菌素 STz 加高热量饮食建立糖尿病大鼠肾脏损伤模型。运用放免、生化、光镜、电镜及美国 Affymetfix公司的基因表达谱芯片、RT—PCR等先进检测手段和方法，观察了多项指标，尤其是通过聚类分析寻找 和DN有重要相关性的基因，并进一步采用实时荧光定量RT-PCR法做验证实验研究。结果：鸟嘌呤核苷酸结合蛋白 Rat2302．0 G蛋白 a12 Gnal2 ，在糖尿病大鼠肾脏表达下调，肾消康治疗组表达上调。结论：应用Aff3釉etrix 基因表达谱芯片检测糖尿病大鼠肾脏基因的表达，Gnal2是筛选出的肾脏差异表达基因和药效靶点之一，并对该基 因做荧光定量RT-PCR测序分析。这在国内外尚属首次。基因功能分析表明，在糖尿病状态下，Cmal2表达下调，与 糖尿病肾脏损伤有重要相关性，而经肾消康治疗后大鼠肾脏组织中Gnal2表达上调，可见肾消康对Gnal2基因表达 具有良性调节作用，其作用机制还有待于进一步研究。 12 关键词；肾消康；糖尿病；肾脏损伤；基因表达谱；鸟嘌呤核苷酸结合蛋白 G蛋白 a tissues Effectof OHDiabetic Ratsrenal nephropathy ShenXiaoKang Gene．Gnal2 Expression observethe effectofa of onDNmtsanddiscuss therapeuticalcomplexprescriptionShenxiaokang Abstract：Objective：To actioninthetreatmentof dataforclinical model themechanismof DN，then experimental practice．Methods：The provide oflowdoseSTZand caloriediet．Kindsofexamination ratsmaleWistarWerCestablishedwith high multipleinjections methodswore microscrope， radiommunoassay，biochemistry,lightmicroscope，electron applied,including Co．US．Rat2302．0 realtime revei∞ chip，and quantitative immunohistochemical。Affymetrixgeneexpressionprofiling chainreaction toobservetheeffectof onindicators．Most transcriptionpolymerase technique Shenxiaokang especially withDN．andfurther RT--PCRtodo cluster methodtomakecertain associated applied analysis important genes applied Was intheDNmodel rat and in confLm搪toryexperiment．Results：Gnal2gene down-regulation groupkidneysup-regulation treatmentrat Co．US．Rat2302．0 the Affymetrix Shenxiaokanggroupkidneys．Conclusions：Applied geneexpression renaltissues Wasoneoftherenaltissues totestDiabetic Rats profilingchip nephropathy genesexpresstion．Cmal2gene real revcr$e chain and effect time difference Applied quantitativetranscriptionpolymerase Expresstiondrug targets．and it．ItWasthefirsttimeathomeandabroad．Tofunctio