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石蒜试管鳞茎膨大初步研究 摘 要：以MS为基本培养基，6一BA和N从为植物生长激素，探究了不同激素浓度配比对石蒜愈伤组织增殖及分化 的影响，并以愈伤组织分化形成的不定芽为材料，应用正交试验方法研究了大量元素浓度、蔗糖浓度、活性炭浓度 对石蒜试管鳞茎膨大的影响。以期获得最优组合配方促使鳞茎膨大，提高石蒜试管苗移栽成活率。结果表明：MS+ 在鳞茎膨大试验中，大量元素浓度为标准浓度Ms时形成的鳞茎最大；高浓度的活性炭有利于鳞茎的膨大，2，Og／L 为最佳浓度：蔗糖浓度为409／L时，鳞茎膨大效果显著：比较三因素的交互作用发现，MS+40g／L蔗糖+1．0g／LAC 为最佳鳞茎膨大培养基配方，鳞茎鲜重可达到0．909，增重4．29倍，直径达到1．00cm，高度为1．24cm。 关键词：石蒜；愈伤组织；增殖；分化：试管鳞茎；膨大 石蒜 Lycor西radiate 为石蒜科石蒜属鳞茎类多年生草本植物【11，别名老鸦蒜、蒜头草、蟑螂花、 龙爪花、红花石蒜【2】，外国人称它为魔术花【31。我国约有17种 含变种 ，其中15种为我国特有， 主要分布于长江以南的江苏川、浙冽51、安徽等省区f61。石蒜于盛夏初秋开花，花开无叶，花色鲜红。 深秋季节抽叶，叶线性，深绿色，中央有一条淡绿色条纹‘71，是优良的观花观叶地被植物。同时石 蒜也是重要的药用和工业用植物，具有调节中枢神经和心血管系统及抗癌、抗肿瘤等作用【8J；石蒜 鳞茎中所含淀粉可用于加工生产酒精、造纸糊料，并且不会对环境产生污剩91。 1材料与方法 1．1供试材料 石蒜由江西农业大学花卉盆景基地提供，选取石蒜鳞茎，石蒜组培苗叶片作为外植体材料建立组 织培养再生体系。以外植体诱导出的愈伤组织及其分化形成的不定芽为试验材料。 1。2试验方法 1．2．1试管不定芽的获得 lcm ，转接到含不同浓度配比的植物激 将组培过程中诱导出的愈伤组织块切割成小块 1cm 素的MS培养基中，进行愈伤组织增殖、分化试验，试验共8个处理，重复3次。培养40～50d后， 统计红花石蒜的愈伤组织在不同培养基上的增长及不定芽分化情况。 1．2．1试管鳞茎的膨大 将通过增殖与分化培养获得的红花石蒜不定芽切割成单芽，转接到MS+6一BAlmg／L+NAA 0．3mg／L培养基上，直至每个单芽直径生长到0．3cm左右时，切去其叶片及根系，接种于含有不同种类 和浓度添加物的膨大培养基上，试验重复2次。培养50．60天左右后，统计鳞茎鲜重、增重倍数、 鳞茎直径、高度、鳞茎指数等指标。 1．2．3测量方法 初始单芽鲜重 接种单芽后培养基与瓶的总质量一未接种前的培养基与瓶的总质量 鳞茎的鲜重：从培养基中取出诱导的小鳞茎 不定芽 ，剪去叶片和根，称鲜重。 鳞茎直径、高度：用直尺测量试管鳞茎的直径、，高度。 愈伤组织增殖系数 培养后愈伤组织体积胺入时愈伤组织体积 愈伤组织分化率 出芽的愈伤组织块数／愈伤组织总块数 ×100％ 分化芽数 不定芽总数／出芽的愈伤组织块数 鳞茎增重倍数 最终形成鳞茎鲜重／初始单芽鲜重 鳞茎指数 鳞茎高度／鳞茎直径 2结果与分析 2．1石蒜愈伤组织的增殖与分化 石蒜愈伤组织在不同激素浓度配比的培养基中进行继代增殖 表1 ，30d后可发现，愈伤组织 在7号培养基中增长较明显。NAA浓度一定时，愈伤组织增殖倍数随着6-BA浓度的增加呈现先增 6-BA浓度升高至7mg／L时，增殖倍数下降，说明细胞分裂素类似物浓度的提高对愈伤组织的增长 有明显的效果，但不宜过高；6-BA浓度一定时，增殖倍数均随着NAA浓度的增加而增加，表明较 高浓度的生长素类似物有利于愈伤组织的生长。由上可知，生长调节剂的不同浓度配比组合对愈伤 继代增殖时，愈伤组织体积增大后质地仍较疏松，呈淡黄色；在随后继代过程中，可发现愈伤组织 质地逐渐变紧实，呈乳白色；继代三次以上，愈伤质地坚韧，切口及表面易褐化，最终导致材料死 亡。 在进行愈伤组织增殖的试验过程中，愈伤组织极易分化出芽。在培养30d时，观察到愈伤组织 表面出现白色芽点，随后不断分化出芽；培养50---60d，芽顶端分化出绿色叶片。但是添加不同浓度 配比的植物生长激素，不定芽分化情况大不相同。表现为当NAA浓度不变，分化率随着6-BA浓度 势较壮，植株较高大，鳞茎直径达0．3cm左右。由此看出，低浓度的植物生长激素组合有利于不定 分化培养基配方。同时，在培养过程中发现，部分培养基不仅能分化出不定芽，并伴有不定根的分 化，添加lmg／L6一BA与0．5mg／LNAA的MS培养基生根率达到100％，MS+7mg／L6-BA+0．5mg／L NAA培养基能分化出绿色的不定根。 表1不同激素浓度配比对石蒜愈伤