大豆异黄酮测定方法概述.pdfVIP

维普资讯 西部粮油科技 ／2003年第6期 CHINAWESTERNCEREALSOILSTECHNOLOGY ／2003，No．6 59 大豆异黄酮测定方法概述 管军军，方希修 (江南大学食 品学 院，江苏 无锡 214036) 摘 要：从几个方面论述了紫外分光光度法、薄层扫描法、高效液相色谱法、高效液相色谱一质谱法、气相色谱法以及毛细管电 泳法测定大豆异黄酮的方法、特点及操作要领，并对医学上测定大豆异黄酮的方法进行了简要介绍。 关键词：大豆异黄酮；测定方法；紫外分光；色谱法；质谱法；毛细管 电泳法 中图分类号：TS 207．3 文献标识码 ：A 文章编号：1007—6395(2003)06—0059—02 大豆异黄酮 (soybeanisoflavones，简称 ISO)是一类从大 ⑥ 试样中大豆总异黄酮含量的测定。分别精密吸取试样 豆中分离提取的主要活性成分 ，具有异黄酮类化合物的典型 液 0．3mL于 3只 10mL容量瓶中，以下照校正曲线制备项 结构I】1。目前发现的大豆异黄酮共有 12种，分为游离型的甙 下操作，在 259nm处测定吸光度，计算平均值，按校正曲线 元 (aglycon)和结合型的糖甙 (glucoside)两类 ，主要活性成分 方程计算含量，并计算试样的大豆异黄酮百分含量。 为两种含量较高的苷元成分：金雀异黄素 (genistein)和大豆 2 薄层扫描色谱法 (TLCS) 素 (daidzein)。生物活性研究表明，ISOt’特别是其中的金雀异 黄素和大豆素，具有抗氧化、抗肿瘤 、改善心血管功能、抗骨 薄层扫描法具有取样量少，操作简便，分离效果好等优 质疏松等功效。大豆及其豆制品一直为东方人的传统食物 ， 点，但其薄层显色剂用量难以准确控制，人为误差较大。 膳食中的大豆异黄酮与东方人 (13本、中国)癌症和心血管疾 赵胜利 ’等采用硅胶G薄层板，以氯仿一甲醇一乙酸乙 病的低发直接相关。国外文献上关于大豆异黄酮的含量测定 酯一水 (2：2：4：1)为展开剂展开，以盐酸羟胺 、硝酸羟铵为显 多采用HPLC法 或气相色谱一质谱 (GC—MS)联用方法，也 色剂 ，选用 440nm滤光片扫描测定了大豆黄素的含量。赵世 有采用金雀异黄素作为标准品，紫外分光光度法测定大豆异 萍等采用硅胶 G薄层板，以甲苯一 甲醇一10％甲酸 (7：3： 黄酮的含量。本文则论述了近年来报道较多的测定大豆异黄 0．02)和醋酸乙酯一 甲醇一50％甲酸 (8：2：0．2)为展开剂分 酮的方法及特点。 离了大豆苷元 、大豆苷等 4种成分，采用双波长反射锯齿扫 描法测定了4种成分的含量。 1 紫外分光光度法(uV) 3 高效液相色谱法 (HPLC) 大豆异黄酮结构中羟基和芳环形成较强的共轭体系，对 紫外光有较强的特征吸收，所以可采用紫外分光光度法对大 高效液相色谱法是 目前测定大豆异黄酮研究工作中应 豆异黄酮含量进行测定，该法具有方法简便 ，重现性好等优 用最为广泛的一种方法，此法具有测定样品范围广 、样品制 点，促特异性较差。张玉梅等研究大豆异黄酮含量的方法为 ： 备步骤少、成本低 、分离效率高 、灵敏度好、测定结果准确等 ① 试样。大孔吸附树脂吸附纯化后提取制得的大豆异黄 特点 ，且有多种检测器可供选择。样品多采用不同浓度的甲 酮提取物 ，浅黄棕色粉末 ，味苦； 醇 、乙醇直接提取 、超声或回流提取后用酸或酶水解后进行 ②标准品溶液的配制。精密称取金雀