鹅细小病毒原位PCR检测方法建立的应用.pdfVIP

590蟋》2010年学术年会 T040062 鹅细小病毒原位PCR检测方法的建立及应用 饶桂波董浩段小波蒋运博胡桂学 (吉林农业大学，吉林长春130118) 引言／目的 parvovirus，GPV)是小鹅瘟(goslingplague，GP)的病原体，是严重危害养鹅 鹅细小病毒(goose Bank中已发表的GPV的B株基因序列设计特异性引物和寡核苷酸 业的重要病原之一。本研究根据Gene 标记探针，优化样品处理、原位PCR扩增和原位杂交等条件，建立对组织中GPV核酸进行检测和定位的 间接原位PCR方法，并通过对自然感染GPV高免血清紧急免疫后第6天的鹅肝脏和空肠组织进行检测， 初步将间接原位PCR用于小鹅瘟的诊断和流行病学调查。 材料方法 根据GPV的VP3基因序列设计PCR引物和寡核苷酸探针，以GPV感染鹅肝脏和空肠组织石蜡标本制 作切片，经蛋白酶K消化、原位PCR扩增和碱性磷酸酶标记的寡核苷酸探针原位杂交，建立了检测石蜡