“一测多评”法用于栀子金花丸多成分含量测定的可行性研究.docVIP

“一测多评”法用于栀子金花丸多成分含量测定的可行性研究 　　[收稿日期] 2014-02-21 　　[基金项目] 国家药品标准提高暨2015年版药典科研项目；中医药行业科技专业项目（200707009），国家“重大新药创制”科技重大专项（2012Z009）；国家科技支撑计划项目（2011BAI03B01）；国家重点基础研究发展计划（973）项目（2012CB724001）；国家自然科学基金项目 　　[通信作者] *冯伟红，副研究员，研究方向为中药质量分析，E-mail：weihong_bj@126.com；*王智民，研究员，研究方向为中药化学与质量控制，E-mail：zhmw123@263.net 　　[作者简介] 赵倩，硕士研究生，E-mail：zhaoqian_ny@163.com 　　[摘要] 目的：利用一个对照品同步测定栀子金花丸中10种成分的含量，探讨“一测多评”技术在中成药不同类型化合物质量评价中应用的可行性。方法： 以栀子金花丸为研究对象，采用高效液相色谱法，以大黄素为内参物，在254 nm检测波长下，建立小檗碱、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、芦荟大黄素、汉黄芩素、大黄酸、大黄酚、大黄素甲醚与大黄素间的相对校正因子。采用外标法测定栀子金花丸中大黄素的含量，通过待测成分间的相对校正因子计算栀子金花丸中其他9种成分的含量；并将“一测多评”法的计算值与外标法实测值用相对误差进行评价，以验证“一测多评”法的技术可行性和方法适用性。结果：2种计算结果没有显著性差异，相对误差5%。结论：“一测多评”的质量评价模式可用于栀子金花丸中3种不同类型化合物的多指标同步质量评价。 　　[关键词] “一测多评”法； 相对校正因子； 生物碱； 黄酮； 游离蒽醌； 栀子金花丸； 质量评价 　　中成药的质量长期以来多以单一指标进行控制，难以真正体现中药的多效性和整体性。中药多靶点的作用特点要求对其进行多成分质量控制[1]，因此多成分同步测定的质量控制模式应运而生，但商品化对照品的供不应求和多指标控制高昂的检测费用限制了该模式在实际生产、科研和监管领域的应用[2]。“一测多评”中药质量评价模式为解决该矛盾提供了新思路。该模式提出后在单味中药材[3-11]和中药复方制剂[12-14]的质量控制研究中得到了广泛应用，但均以同一类型化合物的质量控制研究居多。本研究以栀子金花丸中的黄连生物碱、黄芩黄酮和大黄游离蒽醌3种不同结构类型的10个化学成分为研究对象，探讨“一测多评”技术在中成药多组分质量控制中应用的技术可行性和方法适用性。 　　栀子金花丸始载于《宣明论方》[15]，由栀子、黄芩、大黄、黄连、黄柏、金银花、知母、天花粉8味中药组成，栀子金花丸具有清热泻火、凉血解毒的功效，用于肺胃热盛、口舌生疮、牙龈肿痛、目赤眩晕、咽喉肿痛等[16]。目前的文献报道中对栀子金花丸的质量控制研究主要是借助常规HPLC进行同类型化合物的含量测定[17-21]，2010年版《中国药典》中也仅以栀子苷为检测指标，难以真正体现和保证栀子金花丸的内在质量。依据栀子金花丸的功效、适应症及各单味药所含成分已知的药理作用推测，黄连生物碱、黄芩黄酮和大黄游离蒽醌应为其主要药效成分，因此对小檗碱、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚等10个成分进行质量控制可有效地保证该药的质量和药效。 　　1 材料 　　Shimadzu LC20A 高效液相色谱仪，包括LC-20AT溶液传输单元，SIL-20A 自动进样器，SPD-M20A 二极管阵列检测器，LC Solution色谱工作站（日本岛津公司）；Waters Alliance 高效液相色谱仪，包括2695 溶剂管理系统，2996二极管阵列检测器，Empower2 色谱工作站（美国WATERS公司）。 Syncronis C18色谱柱（4.6 mm × 250 mm，5 μm），Welchrom C18色谱柱（4.6 mm × 250 mm，5 μm），SpursilTM C18色谱柱（4.6 mm × 250 mm，5 μm），Accurasil C18色谱柱（4.6 mm × 250 mm，5 μm）。 　　对照品盐酸小檗碱（批号110713-200911，质量分数以86.8%计）、黄芩苷（批号110715-201016，质量分数以94.0%计）、黄芩素（批号111595-200905）、芦荟大黄素（批号110795-201007）、大黄素（批号110756-200110）、大黄酚（110796-200716）、大黄酸（批号110757-200206）和大黄素甲醚（批号110758-201013）均购自中国食品药品检定研究院，供含量测