孔鳐外周血细胞的显微观察.pdf

And 【科技与管理】TechnologyManagement 2012年第5期(总帮397瑚)1、 孔鳐外周血细胞的显微观察 应巧英，叶盛，陈玲，路冰岩 (浙江海洋学院水产海运学院，浙江舟【LI316004) 摘要：利用光学显微镜观察孔鳐Ral3 G／inther外周血细胞的显微结构。通过瑞氏染色可以发现，孔鳐外周 porosa 血中含有红细胞、淋巴细胞、单核细胞、血栓细胞、嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞，没有观察到巨噬细胞和嗜碱性粒细胞。 测量了部分细胞的长短径和细胞核的长短径。止D#I-，还观察到一种不能鉴定的疑似为浆细胞的细胞，以及成熟红细胞和 未成熟红细胞、大小差异巨大的两种淋巴细胞、多种存在形式的血栓细胞和血栓细胞侵蚀其他细胞的现象。 关键词：孔鳐；血细胞；显微结构 中图分类号：R4 文献标志码：A 文章编号：1000—8772(2012)10—0094—03 孔鳐(Ra；aporosaGnnther)分布在我国黄海、东海沿海，是 l。3显微观察与照相 一种传统性地方经济鱼类。 在高倍镜下观察72个血涂片中的血细胞，进行分类鉴别： 国外早在19世纪末就有了对鱼类血细胞形态结构的研 总数100个血细胞，分类统计每种血细胞的数值，统计5次后 究，我国从20世纪60年代开始也陆续有这方面的报道。多年计算每种血细胞的平均值，再计算其百分比。然后用纤维量尺 来，已有许多学者先后对鳗鲡等水生动物的血细胞进行过显微 测量ABCi条鱼的红细胞、淋巴细胞、血栓细胞和单核细胞的 结构研究，有些甚至深入到亚显微结构水平，为这些动物的其 长短径以及红细胞细胞核、淋巴细胞核、血栓细胞核的长短径： 他基础研究提供了详实的资料。但到目前为止，国内对鱼类外 每个数据皆由20个样本数据得来。实验所得数据用Excel统计 周血细胞显微和超微结构的研究大多集中于淡水鱼类：而有关 软件进行数据处理，内容包括样本均值x、样本标准差SD，以及 海水鱼类外周血绌胞形态学的研究资料极少。 T检验。之后在莱卡DM—IL倒置生物显微镜上进行显微照相， 挑选清晰的照片作为保存并记录其组别。 1材料与方法 2结果 1．1实验材料 试验用孑L鳐于2011年11月购买于舟I上J市沈家门东河菜 2．1染色时间造成的差异 通过观察中的比对可以发现，不同类型的血细胞在不同时 场，雌鱼2条、雄鱼I条。体长38cm～47cm，体重1．2cm～1．5KG。将 三条鱼按照体重从小到大分别编号为A、B、c，其中c为雄鱼。 间下效果各不相同，但是在甲液35s、乙液5min的时候染色效 1．2血涂片制作 1．2．1血液采集与血膜制作 缩的现象，影响观察。对比情况见版图a。 本实验采用柠檬酸钠作为抗凝剂，浓度为4％。ea)-5lll配置32．2血细胞的种类和形态 份100ml的抗凝剂置于三个烧杯中。三条鱼皆通过断尾法采集 2．2．1红细胞(erythroblast) 血液，断尾后通过挤压可获得5～7ml的尾椎静脉血。取一条鱼 观察可以发现，红细胞分为成熟红细胞(见版图b)和未成 的血液后，立即制作血涂片，再开始第二条鱼的采血。 熟红细胞(见版图c)两种。其中未成熟的红细胞多数为圆形或 用胶头滴管在含血液的抗凝剂溶剂中沾取一滴血液，轻轻 偏向圆形，细胞核大且呈圆形位于中央；而成熟的红细胞呈长 滴在载玻片的中央偏左，然后用另一块载玻片以35～45。的角度， 椭圆形，细胞核较小位于中央且界限清晰。 盖住血液，待血液沿玻片端展开，轻轻匀速向右推进，完成血液 2．2．2淋巴细胞(1ymphocyte) 薄膜的制作。推片时注意推片边缘要平滑，推片时用力均匀，保 有的淋巴细胞