人工饲养条件下不同年龄自然死亡实验恒河猴的肝脏病变谱分析.pdfVIP

608 201 1东莞第二届国际小型猪学术论坛暨大型实验动物生物医药研究应用研讨会 实验动物是非常主要的实验资源，对实验动物的质量控制是保证实验结果精确的前提，目前主要的烈 性传染性致病因素已经得到了有效监控，但是按现有标准检测合格、外观健康的恒河猴，也可能存在一定 程度的由自然发病因素导致的病理学病变，并影响到实验动物的饲养和实验结果的评析。国外学者对实验 猴等大型实验动物的自发疾病和老化性疾病的研究较为重视[1,21。国内对实验动物自发病变的研究还很不 足，有关实验动物的病理检测资料尚未建立，研究人工饲养条件下实验动物脏器病理变化，有助于我们对 实验动物的自发病状况有更科学的认识，对于实验动物质量控制和实验动物应用具有重要意义。 恒河猴(Macacamulatta)是非常重要和珍贵的实验动物，在人类学、医学、药学等研究中具有重要作用 [3-5]。肝脏是非常重要的脏器之一，结构功能复杂。肝脏是实验动物较易发生病变的器官，也是重要的造模 器官和药物实验靶器官。本课题选取了155只无人为干扰因素自然死亡的实验恒河猴，对肝脏做了病理剖 检和显微镜下组织学观察，以期了解自然死亡实验恒河猴肝脏病理改变特点，丰富完善实验猴自发病研究 资料。 1．材料方法 1．1实验动物 恒河猴肝脏组织样品取自云南省地区1998年2008年有资料记录的155只自然死亡实验猴尸检材料， 只，雄性64只。均系在饲养期间非人为因素死亡。对照组为成年健康实验猴肝脏组织学切片，取自本课题 1．2解剖固定 mL， 实验猴死亡2h以内解剖，将肝脏放于广口玻璃容器中用10％福尔马林液固定，固定液量约为2000 h。 固定时间不小于72 1．3取材 观察肝脏性状，质地，颜色。沿肝门方向将肝切开，检查肝脏各叶及胆管，连续平行切成片状，检查 cm×2．0 是否有肿物、实变、坏死、出血等病变。常规病理方法取材，组织块大小约为2．0 cm，厚度约为 0．3cm。 1．4脱水制片 SHANDONExcelsior ES脱水机脱水：常规石蜡包埋；MICROM HM325切片机切片(厚度设定为29m)； LEICAAutoStainner XL染色机HE染色、封片。 1．5组织学观察 BX41光学显微镜下，按4倍、10倍、40倍顺序观察。2名有经验的病理医师显微镜下分别观 在Olympus 察并记录病变。所描述病变不同时请第三方上级医师会诊确定。 2．结果 2．1实验猴肝脏病变检出率 155例恒河猴中88例发现肝脏疾病，病变率为56．8％，其中幼年组发生率为33．9％，成年组54．3％， 老年组80．3％。卡方检验示：成年组发病率明显高于幼年组，老年组明显高于成年组(尸．0．05)，见表l。 表1实验猴肝脏病变例数(以)及发生率(％) Tab．1Thedistributionofliverlesionsintherhesus monkeys0，％，P=O．05)． 分组 总计 未检出 检出 发生率(％)P值 冬迪婴 !垒型 塑曼g生!! 里旦!i垒堡墅丝 ￡!垒!塑 幼年组YounggroupYoung 59 39 20 33．9 幼年组vs．成年组 成年组Adult 35 16 19 group 54．3 成年组VS．老年组· 老年缍tOld 61 12 49 80．3 老年组VS．幼年组‘ group