超早期高压氧治疗对脊髓全横断损伤大鼠血液生化及后肢运动功能的影响.pdfVIP

中华医学会第二十次全国高压氧医学学术会议论文汇编 · 153· 皮肤、皮下及筋膜，剥离竖脊肌，暴露T9—11椎体棘突及双侧椎板。模型组与高压氧组均切除T10椎 板，充分暴露T10椎体水平的脊髓，以弯头眼科镊轻轻桃起脊髓并用尖锐刀片横切脊髓，动物即刻出 现摆尾，双下肢抽搐或尿失禁，以无菌纱布按压止血后逐层缝合。假手术组仅行T10椎板切除，不损 伤脊髓，之后逐层缝合。制成脊髓损伤模型。 1．1．4护理 术后每只动物肌肉注射青霉素16万U／d，连续1周。每日定量供应充足饲料和水，在安静、通风 清洁环境下分笼饲养。B、C组两组均采用相同的护理，①人工排尿：术后每日早晚2次，排尿时，左 手撑起大鼠腹部，右手触摸找到充盈的膀胱，然后按住膀胱底，tl上而下轻柔挤压，逼尿排出。②防止 褥疮：挤压膀胱排尿后，及时清理会阴，使其保持干燥，被尿液浸湿的肢体及时用温肥皂水清洗，并用 电吹风吹干。将动物放在软垫上，并常改变体位。局部撒敷褥疮粉，预防后肢水肿。 1．2高压氧治疗 C组在脊髓损伤后3小时即开始高压氧治疗。将武汉七0一研究所提供的婴儿纯氧舱(YLC0．5／ 压出舱。为保持舱内氧浓度稳压全过程持续低流量等量换气。lO天1疗程，共3疗程，其中第一疗程 每日2次，第二、三疗程每日1次，每疗程休息6天。 1．3运动功能评分 自术后第1-6周末由掌握评分标准的固定3人进行盲评。 1．4标本采集 分别于术后l、3及5、6周周末动物眶动静脉采血lmL，血液离心取血清，放于一20℃的冰箱冷冻 保存备用。 取材固定和切片：每组各取一只以水合氯醛腹腔过量(600mg／kg)麻醉后，开胸，剪开右心耳， 另外经心尖插管至升主动脉，在室温条件下，先以150mL生理盐水快速滴注，至流出液清亮为止。继 维持滴注4～5h，以横断处脊髓为中心，取出长约1．5cm的脊髓组织，并以4％多聚甲醛继续固定3h。 保留横断处头、尾两侧各约0．5cm脊髓，常规行冠状面连续切片，片厚5um。 1．5统计学方法 0．05为差异有显著性意义。 2．结果 2．1术后动物一般情况观察 A组大鼠术后第1天功能恢复正常。B组、C组大鼠均出现了极为典型的截瘫综合征，双后肢及尾 无活动。术后l周活动较少，饮食少。B组大便困难伴硬结，尿潴留、肌张力低、下肢肿胀，部分鼠足 部发生溃疡，足趾甚至脱落，对热、触、痛刺激无明显反射；C组2周后部分鼠有明显的后肢运动，平 地拖动，热、触、痛刺激有明显的反射，下肢肿胀恢复明显，尿潴留、尿路感染和褥疮等并发症的发生 也明显降低。实验期间中B组、C组分别有8只、5只死亡。 2．2 BBB运动功能评分 本实验采用BBB评分方法对大鼠CSCI后6周的后肢运动功能进行评分。BBB评估系统认为正常 状态为21分，后肢全瘫为0分。结果发现CSCI后24hA组评分为21分，功能恢复正常。B组、C组 组均出现了极为典型的截瘫综合征，双后肢及尾无活动，BBB评分为0分。术后第2周，B组、C组后 肢运动功能均有所改善，但2组差异并不明显。C组术后第3周部分鼠开始恢复后肢关节运动功能，后 肢肌肉萎缩程度较B组轻．与B组相比有显著差异(P0．05)，详见表1。 154· 中华Ⅸ{e第=十扶±目女＆tⅨ半学术会议论戈F镕 05，6P0 0l{6P0Ol·与Bg同 ＆：5目目t一个时目点M较：‘Po 05‘与AⅢ同一时目点＆较：‘Po 05。 目目点＆鞍z6P0 2 3组织病理学观测(HE染色) 假手术组(A组)大鼠脊髓灰、白质组织结构完整，神经细胞在灰质中分布均匀t形态正常·白质 内神经纤维排列整卉，细胞问质均匀。模型组(B组)损伤区灰质出现太片出血．细胞肿胀，细胞空泡 变性，部分细胞细胞桉固缩．井有大量单核或多核炎性细胞浸润。高压氧组(c组)与模型组(B组) 相比，白质水肿减轻，炎性细胞浸润减轻，空泡变性减轻，细胞排剐较整齐。详见图l_图3。 目l假}木mf×4tiff} 目2#■§【x400} 目3高Ⅱ蕾m[×400) 2 4血液生化结果 血清样品经7170AHITACHI自动生化分析仪自动采样化验。B组、C组血钙、血碑在术后1、3 周高于A组(P005)．血}寿碱性磷酸酶(AL