策勒黑羊BMPR-IB基因exon6的多态性分析.pdfVIP

2011年 3月 第 1期 (总第 150期) 草食家畜(季刊) 策勒黑羊BMPR-IB基因exon6的多态性分析 於建国 ，米 日尼沙 ，许椿善 ，杨 飞 ，董 红 ，古丽格娜 ，季跃光 ，孔艳丽 (1．新疆畜牧科学院畜牧所，新疆 乌鲁木齐 830000； 2．新疆策勒县畜牧兽医局，新疆 策勒县 848500； 3．新疆和 田地区畜牧兽医技术推广站，新疆 和 田848500) 摘 要：本实验利用限制性 内切酶Eco47I检测策勒 黑羊骨形态发生蛋 白受体基 因(BMPR-IB)外显子 6 (exon6)序列限制性片断长度多态性(RFLP)，结果显示 ：30只策勒黑羊BMPR—IB基 因eXOll6酶切后 出现 140bp、1lObp和 30bp长度 的片段 。BB型 3只，占9．09％；B+型 12只，占36_36％；++型 18只，占54．55％。。B 基因频率为 0．27，+基 因频率为 0．73。 关键词 ：策勒黑羊；BMPR—IB；1kFLP；多态性分析 中图分类号 ：Q783 文献标识码 ：A 文章编号 ：1003—6377(2011)01—0044—03 l 研究现状 料统计 ，策勒黑羊平均产羔率为215．46％，本实验通过 近年来 ，国内外研究绵羊多胎性能方面取得一定的 BMPR—IB基因exon6的多态性来进行策勒黑羊多胎性 进展，其中研究最清楚的是候选基因BMPR—IB。1991 能的分析研究。 年，澳大利亚和新西兰科学家研究证实了Booroola羊高 2 材 料 繁殖力属于常染色体基因遗传 ，遗传突变是由碱基的点 2．1 样 品的采集 突变，重复或缺失引起的。现在 ，该基因被绵山羊遗传命 策勒县策勒乡选择 33只策勒黑羊 ，采颈静脉血约 名委员会命名为 FecB，该单拷贝基因’可控制 I．3-I．6个 4ml于真空抗凝管中，颠倒几次后冷藏带 回实验室 ，一 卵 ，双拷贝可控制2．7-3．0；对于产仔数来说 ，每单 、双拷 20℃保存备用。 贝的基因控制0．9～1．2、1．1-1．7。法国Mulsant等证明绵 2．2 核 DNA的提 取和检 测 羊高繁殖力FecB座位被定位到绵羊6号染色体对应于 根据酚一氯仿抽提法Ⅲ提取核DNA。 人染色体4q22—23的区间，该区间包含骨骼形态发生蛋 2．3 引物 的来源 白受体 IB(BMPR—IB)基因。Souza等 (2001)，Mulsant等 BMPR—IB基因 exon6序列扩增引物参照 Theresa (2001)，Wilson等 (2001)几乎同时报道 ，Booroola绵羊 Wilson等2[1和王启贵等31【对绵羊BMPR—IB基因多态性与 BMPR—IB基因编码区高度保守的胞 内激酶信号区域的 其产羔数的研究资料，引物序列如下 ： 746位上发生了A—G转换 ，使受体细胞 内激酶区编码 Primerl：5一GTCGCTATGGGGAAGTITGGATG一3 蛋 白由野生 型的谷氨 酰胺变 为 Booroola羊 的精氨 酸 Primer2：5一CAAGATGrITrITCATGCCTCATCAACACG (Q249R)，造成该受体部分失活 ，而导致此受体对配体 GTC一3 GDF一5和 BMP一4不敏感 ，从而使得高剂量 的 GDF一5和 BMPR—IB基 因exon6序列 PCR扩增 ，反应体系见 BMP一4抑制孕酮的分泌 ，使排卯率上升，最终导致多胎 表 1。 性 能 的表 现 。 表 1 BMPR—IB基 因 exon6部分序列的PCR反应体系 王根林等 (2003年 )研究发现湖羊和小尾寒羊群体 Table 1 Componento