胆管癌中GLUT1和HIF-1a基因蛋白的表达及临床意义.pdf

二、英文缩略语……………………………………………………………………8 三、论文 前言……………………………………………………………………………9日U舀……………………………………………………………………………V 材料和方法……………………………………………………………………9 1 结果……………………………………………………………………………l 讨论……………………………………………………………………………14 结论……………………………………………………………………………16 四、本研究创新性的自我评价……………………………………………………17 五、参考文献………………………………………………………………………18 六、附录 综述……………………………………………………………………………20 致谢……………………………………………………………………………28 个人简介………………………………………………………………………29 意义 刖 吾 在恶性肿瘤中，细胞的增殖超过了肿瘤的能量供应，因此细胞对氧和营养的过 度消耗可导致肿瘤微环境为低氧、低糖和酸性，这种情况在实体肿瘤中更明显。 在乏氧状态下，组织通过有氧氧化获得能量的能力明显降低，而更主要的是通过 无氧糖酵解来满足肿瘤生长需要的大量能量。这意味着为满足细胞快速生长增殖 l，Glutl) 的高能量需求，细胞要摄取大量糖，葡萄糖转运蛋白l(glucosetransporter 表达异常升高可能为癌细胞摄取葡萄糖增多的机制之一。缺氧诱导因子 inducible la(hypoxia 的关键性转录调控基因，能激活许多缺氧反应性基因的表达，使组织产生一系列 适应反应而得以在缺氧状态下生存。其中就包括HIF．1a可以促进肿瘤细胞葡萄 糖转运蛋白(Glut)基因的表达，以满足肿瘤生长的能量需求。因胆管癌近几年的 组织中Glutl与HIF．1a表达相关性的研究报道。本研究主要探讨胆管癌组织中Glutl 与HIF．1a表达及意义。 材料和方法 一、一般资料 标本来源选择中国医科大学附属盛京医院病理科存档石蜡包埋标本(2005年 1月_2008年12月)手术切除原发性肝外胆管癌标本90例。所有标本术前均未进 行放化疗，并经病理确诊胆管癌组织，对照为5例正常胆管组织。病例标本中男 性例数为：47例，女性标本为：43人。5例正常胆管组织。年龄34---75岁，平均 6l岁，按胆管癌病理分级：高分化28例，中分化38例，低分化24例。淋巴结转移 34例。无淋巴结转移者为56例。按UICC分期标准进行分期，I期22例，II期34例， III期25例，Ⅳ期9例。 骤按说明书操作，DAB显色，同时用PBS代替一抗作阴性对照，用已知的阳性切 片作阳性对照。 3、观察 对于上述染好的切片请1位对病情不了解的病理科医生观察染色结果，Glutl的阳 性着色为细胞膜上棕黄色颗粒；HIF．1a蛋白阳性表达为胞质出现棕黄色颗粒。在 000个，观察着色强 高倍镜下(×400)随机选择5个视野，各计数200个细胞，共计1 度并计算每张切片阳性细胞百分率。Glutl阳性分级标准：先按着色强度打分I无 色0分，浅黄色1分，棕黄色2分，棕褐色3分；再按阳性细胞所占百分比打分，参 ％为2分，50％为3分；着色强度与阳性细胞百分比的乘积：0．-一3分为阴性(．)， 度打分：无色0分，浅黄色1分，棕黄色2分，棕褐色3分；再按阳性细胞所占百分 比打分，参考Zhong等的报道：无阳性细胞数为O分，阳性细胞数1％为1分，1 ％～10％为2分，10％～50％为3分，50％为4分；着色强度与阳性细胞百分比 12分为强阳性(卅)。统计学处理采用SPSSl3．0软件包，相关关系的分析采用 Spearman等级相关分析法。 结 果 一、Glut．1的表达结果 Glut．1的阳性染色位细胞膜上出