不同来源幽门螺杆菌对蒙古沙土鼠胃粘膜上皮细胞增殖作用的影响.pdf

·中文论著摘要· 不同来源幽门螺杆菌对蒙古沙土鼠胃粘膜上皮细胞 增殖作用的影响 刖 吾 幽门螺杆菌感染是胃癌发生的重要危险因素。目前认为蒙古沙土鼠是最理想 的研究且pylori致病作用的动物模型。辽宁庄河是我国北方胃癌高发区，流行病 学调查资料显示当地且pylori检出率高达79．3％，明显高于胃癌低发区，当地居 民有食用咸猪肉的饮食习惯。本室前期从盐腌咸猪肉中培养出且pylori。那么在 高盐环境中生存的Hpylori生物学特性是否会发生改变，其致病作用是否发生变 化目前还不清楚，其毒力如何，致病机制如何，尚不知晓。本研究利用从庄河胃 癌高发区咸猪肉和人胃粘膜中培养出的且pylori感染蒙古沙土鼠，观察咸猪肉源 性It．pylori对蒙古沙土鼠胃粘膜上皮细胞的增殖作用，检测不同菌株感染蒙古沙 对胃粘膜上皮细胞增殖作用的差异，以期进一步明确幽门螺杆菌的生物学特性、 致病性及其机制。 实验方法 利用本室自行建立的成猪肉源性H (4854)，在微需氧的条件下，进行复苏培养。经菌落特征、形态学染色、PCR、 测序等鉴定方法证实该菌为H X23及 pylori。经胃管灌饲蒙古沙土鼠Hpylori 4854，建立／／．pylori感染的蒙古沙土鼠动物模型，观察咸猪肉源性和人胃粘膜源 性I-L pylori对蒙古沙土鼠胃粘膜上皮细胞的增殖作用，采用免疫组织化学技术， 用统计软件SPSSl1．5对数据进行统计学分析。 勿f 甲 耋日7尺 一、H．pylori的培养与鉴定 尿素酶试验见尿素酶半固体培养基呈红色，即为阳性。在光学显微镜下观察 革兰氏染色呈红色， W-S染色见棕黑色或黑色的呈“S”型、弯曲状、海鸥状、 杆状细菌者为／／．pylori阳性。 二、不同来源Hpylori在蒙古沙土鼠胃粘膜定植情况 蒙古沙土鼠胃粘膜组织采用中性福尔马林溶液固定，制成石蜡切片，HE、 W-S硝酸银染色证实灌饲H pylori实验组胃粘膜组织有月：pylori定植，而对照组 胃粘膜组织未见且pylori定植。 三、不同来源Hpylori感染蒙古沙土鼠胃粘膜形态学变化 组未见异常。第26和52周解剖时蒙古沙土鼠胃粘膜肉眼可见明显的出血，炎症 及溃疡病变，其中溃疡多发生在胃窦部，溃疡呈圆形或卵圆形，边缘稍微凸起。 正常对照组在整个实验过程中，均未见到有粘膜糜烂、出血和溃疡等改变。 H pylori感染蒙古沙土鼠13周后，X23组HE染色胃窦部粘膜下层及固有层 可见大量淋巴滤泡，有浅表性胃炎的表现，4854组未见异常；感染26周X23组 胃窦部有明显萎缩，4854组表现为浅表性胃炎；感染52周，X23组胃窦部表现 为重度萎缩性胃炎伴异型增生，4854表现为浅表性胃炎和胃溃疡。正常对照组在 整个实验过程中均未发现炎性细胞浸润、胃炎等病理改变。 p21表达情况 PCNA标记的阳性细胞呈核着色，在正常胃窦粘膜，阳性细胞主要分布于粘 膜固有层胃小凹区域的腺管上皮中，呈带状分布，形成细胞增殖带，表层上皮几 乎不存在PCNA标记的阳性细胞，而H pylori感染后，PCNA标记的阳性细胞明 显增多，与对照组相比，咸肉源性组和胃粘膜源性组PCNA表达显著提高 细胞主要呈核着色，胞浆亦有表达，阳性细胞主要分布于表层上皮，与对照组相 2 著高于胃粘膜源性组(P0．05)。P21标记的阳性细胞呈细胞浆着色，阳性细胞主 要分布于基底层，表层上皮表达很少。与对照组相比，咸肉源性组和胃粘膜源性 结 论 1、咸猪肉源性和人胃粘膜源性Hp均可引起蒙古沙土鼠胃粘膜上皮细胞 PCNA表达增高，对蒙古沙土鼠胃粘膜上皮细胞有促进增殖作用。 2、咸猪肉源性和人胃粘膜源性Hp促进蒙古沙土鼠胃粘膜上皮细胞增殖作用 可能是因为上调cyc