2-(2-喹啉偶氮)-5-二乙氨基苯甲酸光度法测定生物样品中的钴.pdfVIP

第32 卷 分析化学 （FENXI HUAXUE ） 来稿摘登 第7 期 2004 年7 月 Chinese Journal of Analytical Chemistry 977 ．．．．．．．勺 ． 勺 ． ． 来 稿 摘 登 勺 ． 勺．．．．．．． 2 -（2 -喹啉偶氮）-5-二乙氨基苯甲酸光度法测定生物样品中的钴 1，2 1 2 1 1 胡秋芬 杨继红 李海涛 杨光宇 尹家元＊ 1 （云南大学化学系，昆明650091） 2 （玉溪师范学院化学系，玉溪653100 ） 1 引 言 钴是人体必须的微量元素，大量研究工作表明，钴对铁的代谢，血红蛋白的合成，细胞的发育成熟及成熟细胞的释放 等均有重要的生理功能。缺钴将产生严重的低色素小细胞，而过量的钴却能产生严重的中毒现象，因而生物样品中痕量 钴的测定具有重要意义。 2 实验部分 2 . 1 仪器和试剂 722 型分光光度计（上海第三分析仪器厂）。钴标准准备液：1. 0 g/ L ，使用时稀释成2 . 0 mg/ L 标准工 作液；磷酸二氢钾-磷酸氢二钾缓冲溶液：0 . 5 mol/ L ，pH 4 . 5 ；溴代十六烷基三甲胺（CTMAB ）溶液：1. 0 g/ L ，用10% 乙醇 配制； OADEAB 溶液：0 . 5 g/ L ，用95% 乙醇配制。 2 . 2 实验方法 于25 mL 比色管中，加入钴标准液5 卜g ，CTMAB 溶液2 mL ，pH 4 . 5 的KH PO -K HPO 缓冲溶液5 mL ， 2 4 2 4 OADEAB 溶液3 mL ，摇匀，放置10 min ，加入3 mL 浓磷酸，用水稀释至刻度，摇匀，用1 cm 比色皿，以试剂空白为参比，于 630 nm 处测定吸光度。 3 结果与讨论 3 . 1 吸收光谱 在测定液中，络合物最大吸收为630 nm ，试剂空白最大吸收为470 nm ， = 160 nm ，对比度较大。 A入 3. 2 显色酸度的影响 钴与试剂在弱酸性介质中显色，在pH 3. 6 ~ 6. 5 范围内吸光度最大且稳定，实验选用pH 4. 5 KH PO -K HPO 缓冲溶液控制酸度，用量在5 mL 左右可把pH 控制在适宜范围。但在该酸度条件下，Cu 、Zn 、Ni 、Mn 和Fe 2 4 2 4 等元素也能和试剂显色干扰测定；实验表明：试剂与Cu 、Zn 、Ni 、Mn 和Fe 的络合物在较强的酸度条件下不稳定，而钴的络合 物稳定；因此，实验选择在显色完全后加3 mL 浓磷酸酸化使Cu 、Zn 、Ni 、Mn 和Fe 等的络合物分解，以增加体系的选择性。 3 . 3 表面活性剂的选择及用量 实验结果表明，常见阳离子型和非离子型表面活性剂对体系有明显增敏作用，效果为： CTMAB Tween-80 CPB Tween-20 Triton X-100 。在CTMAB 存在下，体系灵敏度提高近 1 倍。CTMAB 用量在 1