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江西中医药
JIANGXIJOURNALOFTRADITIONALCHINESEMEDICINE
急性再生障碍性贫血病程各阶段 FoxP3+调节性 T细
胞的变化
★ 赵瑞玲 胡致平 周郁鸿 (1.浙江省临安市中医院 杭州 313300;2.浙江省 中医院 杭州
310006)
摘要:目的:观察急性再生障碍性贫血(简称急性再障)患者治疗前、治疗后第3、6个月各阶段CIM CD25 Foxp3调节性T细
胞 (regulatoryTcells,Treg)的变化。方法:采用临床病例观察的研究方法。所有入组病例均采用统一的治疗方案。用流式细胞
术分别检测急性再障患者治疗前、治疗后第3、6个月时的外周血CIM CD25Foxp3Treg数量,以15例正常健康体检者作为
对照。结果:15例急性再障患者发病初期外周血CIM CD25Foxp3Treg占CIM CD25T细胞的(10.59±3.86)%,明显低
于fi_常对照组的(32.91±10.16)%(P0.01),有统计学意义;治疗后第3个月时cD4CD25Foxp3Treg数量为 (18.86±7.
53)%,较治疗前增加 (P0.01),且明显低于正常对照组(P0.01),有统计学意义;治疗后第6个月时CIM CD25Foxp3
Treg数量为(28.31±3.36)%,明显高于治疗前(P0.01)和治疗后第3个月(P0.叭),有统计学意义,与正常对照组相比
无明显差异(P0.05),无统计学意义。结论:急性再障患者发病初期时免疫紊乱最重,cD4CD25 Foxp3Treg含量最低 ,经
治疗后,随着病情的好转Treg含量逐渐增加,治疗后第6个月时免疫紊乱明显减轻,Foxp3Treg含量已接近正常。
关键词:急性;再生障碍性贫血;调节性T细胞
中图分类号:R392.2 文献标识码:B
再生障碍性贫血是免疫因素介导的自身免疫性 2mL淋巴分离液中,置人离心机 以200Or/分,离心
疾病。调节性 T细胞作为具有抑制 自身免疫反应 20分钟后,用吸管吸取 白膜层,分离获得单个核细
的免疫调节细胞,能对潜在的、具有伤害性的自身反 胞,计数细胞后,调整细胞浓度至 l×10/mL。测定
应性细胞进行调控,在诱导、维持和预防自身免疫耐 管和对照管均取50~LPBMNC,分别加入CIM—Per-
受中扮演着重要的角色,这些功能特点使得调节性 cp、CD25一FITC各 20t~L,充分混匀,室温避光孵育
T细胞在再生障碍性贫血发生发展过程 中起着极其 30分钟,加入冷PBS2mL洗涤 1次,1500r/分,离心
重要的作用 。为此,我们用流式细胞术检测了 5分钟,弃上清,加入新鲜配制的固定液 100~L,轻
急性再障患者治疗前、治疗后第 3、6个月外周血 柔混匀,4~C避光30分钟。加入破膜液 100~L,轻柔
CIM CD25Foxp3Treg表达水平 ,以探讨该细胞与 混匀,避光5分钟,用新鲜配制的PBS缓冲液 2mL
急性再障的关系。 洗涤 1次,测定管加入Foxp3一PE20L,轻柔混匀,
1 资料与方法 对照管加入鼠抗人阴性对照 IgG120t~L,轻柔混匀,
1.1 临床资料 以符合 《再生障碍性贫血的诊断 于4℃避光封闭30分钟,用新鲜配制的PBS缓冲液
和疗效标准》 诊断要求的急性再障患者为观察对 2mL洗涤 1次,弃上清,加入 0.5mLPBS,充分混匀,
象。全部病例来 自浙江省 中医院 2008年 7月 一 4小时内上流式细胞仪检测。采用EPICSxL流式
2010年 3月的住院患者,所有入组病例采用统一的 细胞仪进行检测,应用 CellQues软件分析细胞 。在
治疗方案(兔抗人胸腺细胞免疫球蛋 白(ATG)+雄 FSC—SSC散 图点上获取淋巴细胞群,以CIM 和
激素+环孢菌素 +细胞因子),由于治疗过程中使 SSC设 门选择 CIM 阳性细胞分析 CD25表达,选择
用药物使实验指标受到影响,患者死亡、出院等原因 CIM CD25 T细胞分析
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