头孢药物与牛血清白蛋白相互作用研究.pdfVIP

第23卷第5期 甘肃联合大学学报(白然科学版) Vol-23No．5 ofGansuLianhe Sciences) 2009年9月 Journal University(Natural sept．2009 文章编号：1672—691X(2009)05-0051-04 头孢药物与牛血清白蛋白相互作用研究 霍彩霞，何丽君，陈 文 (兰州城市学院化学与环境科学学院，甘肃兰州730070) 摘要：用荧光光谱法、紫外光谱法和凝胶电泳法研究了药物头孢匹胺与牛血清白蛋白(BSA)之间的作用机 制．结果表明，头孢匹胺与BSA之间主要以较强的氢键和范德华力结合，形成的化合物致使牛血清白蛋白的内 源荧光猝灭，猝灭机理主要为静态猝灭．二者结合常数为4．288×i0‘L·tool-1(18℃)，结合位点数约为l，头 孢匹胺和BSA色氨酸残基结合距离，．一2．06nm；同时二者相互作用并不影响蛋白结构，使蛋白质原有生物活 性继续保持． 关键词：牛血清白蛋白；头孢匹胺l荧光光谱法；凝胶电泳法 中图分类号：0657．3 文献标识码：A 蛋白质是药物作用的靶标，联合运用基因密 UV-2550型紫外——可见分光光度计(日本岛 码知识和蛋白质结构信息，药物设计者可以设计 出小分子化合物，抑制与疾病相关的蛋白质，进而 12C型电泳仪(北京市六一仪器厂)． 达到治疗疾病的目的．可以说蛋白质的研究是具 牛血清白蛋白(上海伯舆生物科技有限公 有挑战性的重大前沿科研课题，从不同的角度来 司，生化试剂，分子量为67000)储备于4℃冰箱 研究血清自蛋白与药物的作用，了解蛋白质的结 中；头孢匹胺(吉林省辉南长龙生化药业股份有限 构与功能之间关系、生物大分子与药物小分子相 公司)；三羟甲基氨基甲烷(Tris，上海伯奥生物科 互作用的化学本质都具有很重要的意义．光谱法 与其它方法结合已成为研究生物大分子与小分 子、离子相互作用的重要手段[1]，其用于蛋白质与 NaCI维持离子强度)；实验用水均为二次蒸馏水． 头孢类等药物相互作用的研究已成热点[2d]．头 1．2实验方法 在10mL比色管中依次加入T“s—HCl缓冲 孢匹胺(cefpiramide，CPM)是第四代头孢菌素类 抗生素“]，其研究多在抗菌活性及药代动力学等 方面．本文以荧光光谱法为主，并结合紫外光谱 法、凝胶电泳法，研究了在模拟生理条件下，CPM 蒸馏水定容至刻度，摇匀，室温静置60min．固定 与牛血清白蛋白(BSA)之间的结合作用机制，求激发波长280nm，激发和发射狭缝宽均为5nm， 以lcm石英池测量荧光强度，绘制290～450nm 出CPM与BsA的结合常数、结合位点数、结合 距离、热力学参数等重要的相互作用信息，发现二 的发射光谱，记录341nm处发射荧光强度；以缓 者在作用后，蛋白质仍继续保持原有生物活性．为 冲溶液为参比，测定BSA及与BSA摩尔比为1。 从分子水平了解蛋白质分子与小分子问相互作用 机制，研究CPM在生物体内运输和分布情况，掌 握药物在体内作用机理、毒理和代谢情况等提供 1：20的溶液j 重要信息． 2结果与讨论 1实验部分 2．1 CPM对BSA作用的荧光猝灭光谱 1．1仪器与试剂 BSA为球蛋白，其分子中Trp残基的荧光光 RF．5301PC型荧光分光光度计(日本岛津)；谱对微环境的变化很敏感，其峰位一般在325～ 收稿日期：2009—03-31． 作者简介：霍彩霞(1973一)，女，甘肃天水入，兰州城市学院讲师，从事分析化学教学与研究．