bFGF对新西兰大白兔背部创伤模型修复作用的显微观察.pdfVIP

b险F对新西兰太白兔黄部剑伤模型 监复作用的显微观察 张风春陈云峰苏颜真胡奇芬 (中国人民解放军第466医院北京100081) 创面愈台受多种因素的调节和影响，其中bFGF在剖面愈台中起重要作用，据报道，FGF · 有调节成纤维细胞增殖，促进烧伤创面愈合等生物学括性。我们制作了新西兰大白兔背部创伤 模型，外用生长因bFGF。观察伤口的显微结构变化·进一步研究bFGF促进伤口愈合的机制。 1材料与方法 1．1 bFGF：由暨南大学生物工程研究所提供，用生理盐水配制成1000U／m1．1抗：鼠抗人肌 提供。 】．2动物模型的制作及用药方法：参照文献．实验采用新西兰大白兔14只，体重(2．36士o． 伤口2个，深度从皮肤到肌层，肌层伤口的厚度为0．3cm，用生理盐水冲洗伤口，其中一个伤口 甩无菌纱布包扎好伤口，次日换药。分别于上药后3，5，7d在伤口局部组织取材，经苏木素一伊 红(简称HE)染色、Van 织超薄切片。分别在光学显微境、电子显微镜下观察。 2结果 2．1 HE染色观察结果：bFGF组有明显地促进巨噬细胞增生活化、促进内芽组织生长的作 用。3dbFGF组有明显的巨噬细胞增生，吞噬坏死组织，并伴有纤维母细胞增生，而对照组坏 死组织未清除，各种细胞均无明显地增生。5dbFGF组，伤口表面有少量渗出及坏死组织，低 部肉芽组织生长良好，面对照组坏死组织堆积并伴有感染．7dbFGF组皮下及肌层均有大量 纤维母细胞增生．血管减少，伤口修复，无感染，而对照组明显水肿，炎性细胞浸润。 。 2．2肉芽组织染色观察结果：见表1 VG染色显示：5dbFGF组呈现粉红色强阳性显色·而对照组只显淡粉色。7d实验组粉色 加重，肌肉组织染成黄色。 - 对照组呈阳性。 襄1 bFGF对剖面内芽组织生长的影响(5d煅) 108 个为++，50个为+++。 2．3免疫组化染色：肉芽组织中肌纤维母细胞及鳞状上皮增生的基底细胞中肌动蛋白免疫组 化染色表明，胞浆呈棕黄色或黄色为阳性。3d伤口均无阳性细胞，5d的dFGF组在伤口的底部 有少量散在的阳性细胞，7d的bFGF组伤口从皮下到肌层弥漫分布肌纤维母细胞．根据染色 程度及阳性细胞的分布范围可分为：强阳性，阳性细胞弥漫分布，呈棕黄色；阳性，阳性细胞局 限分布，呈黄色；阴性，无阳性细胞分布．7dbFGF组和对照组肉芽组织免疫组化染色结果分别 为：肉芽组织肌纤维母细胞中的肌动蛋白呈阳性染色(黄色)，核呈蓝色；肉芽组织肌纤维母细 胞中的肌动蛋白呈弱阳性染色(黄色)，核呈蓝色。， 2．4电镜观察结果：7dbFGF组创面肉芽组织中各细胞间隙大，胞质内纵横排列张力细丝发 达，粗而致密，游离核糖体排成串珠状，多且密集，蛋白质合成旺盛；核内常染色质较多，成细颗 粒状，核膜内缘的染色质只有一薄层，呈山脉状，核仁明显，附着在核仁上的异染色质也少，成 颗粒状，细胞合成机能旺盛，处于迅速增状态。创面肉芽组织中可见大量肌纤维母细胞，胞体 大，胞质中粗面内质网排列紧密，轻度扩张，腔内有低电子密度絮状物，说明蛋白质、基质等合 成旺盛，细胞胞浆内散在有肌微丝和致密斑，对照组细胞排列紧密，间隙小．游离核糖体少且稀 疏，核内常染色质也少。 3讨论 3．】bFGF有明显地促进创面巨噬细胞增多、吞噬功能增强的作用。实验组损伤初期，炎性细 胞浸润明显，可能是bFGF促进内皮细胞增生，同时损伤刺激内皮细胞产生一系列活性因子如 趋化因子，吸引自细胞及单核细胞的移动，进一步衍生为巨噬细胞。内皮细胞还产生血小板生 创功能和促进肉芽组织增生。 3．2 bFGF可促进肉芽组织的生长。肉芽组织具有重要的生理功能，抗感染，保护剖面；机化 血凝块、坏死组织及其它异物；填补伤口及其它组织缺损等。显微观察结果表明，实验组肉芽组 织生长明显早而且快，其中的毛细血管、成纤维细胞、DNA等的含量盟显高于对照组，对于保 护伤口，加快修复具有重要的意义。 3．3 bFGF有明显促进伤口收缩的作用。伤121收缩对创伤愈合意义十分重要，伤口收缩．伤口 面积减小，只需少量的新生组织就可修复刨面，同时面积的减少