原壳小球藻对6种常用抗生素的敏感性评价.pdfVIP

第12卷第7期 中国食品学报 Vol-12No．7 20 1 ofChinese ofFoodSconce 0 l 2 2年7月 Journal Institute and Jul。2 Technology 原壳小球藻对6种常用抗生素的敏感性评价 淦志兵 李美芽 施春雷 史贤明 (上海交通大学农业与生物学院食品科学与工程系 陆伯勋食品安全研究中心 上海200240) 摘要 目的：评价原壳小球藻对6种常用抗生素的敏感性，找到合适的抗生素作为藻株遗传改造的抗性标记。 方法：在固体培养基中筛选最适合用于原壳小球藻筛选的抗生素。然后在液体培养基中加入不同浓度的抗生 素，分别在第4天，第7天，第14天和第21天测定藻液的0D4d0值并计算抗生素对藻的生长抑制率(P％)。根据 抑制率(P％)与抗生素浓度(C)的关系来评估原壳小球藻对抗生素的敏感性。结果：经过2周的筛选试验，在固 体培养基中，潮霉素的致死剂量为20斗咖L，链霉素、卡那霉素、壮观霉素、氯霉素的致死剂量分别超过100、 500、100、600 p,g／mL。而在G418质量浓度为5¨g／mL时，原壳小球藻的生长就受到显著的抑制；当质量浓度为 10Ixg／mL时已经完全抑制了原壳小球藻的生长．因此，对于G418而言，10trg／mL是原壳小球藻生长的致死荆 量。在液体培养基中，G418的作用剂量与固体培养基中的剂量一致，并且5 Ij,g／mL对原壳小球藻生长的抑制率 维持在80％以上。10I_Lg／mL对原壳小球藻生长的抑制率维持在95％左右。结论：原壳小球藻对氯霉素不敏感， 对卡那霉素、链霉素、壮观霉素较为敏感，对潮霉素表现出高度敏感性，对G418最敏感。与其它5种抗生素相 比．G418更适合作为原壳小球藻遗传转化的抗生素抗性选择标记。 关键词 原壳小球藻；抗生素；选择标记；基因工程 文章编号1009—7848(2012)07-0171—07 物。同时，在天然类胡萝卜素、水产养殖饵料、畜牧 小球藻属于绿藻门(Chlorophyta)绿球藻目 饲料添加剂的生产【”、农药活性评估M等方面也具 (Chlorococcales)卵囊藻科(Oocystaceae)小球藻属 有广泛的应用前景。 (Chlorella)，是单细胞的真核生物，也是第一个被 人工培养的微藻，包括约10个种，常见的有蛋白 养方式。可以在细胞内积累大量叶黄素。含量达到 核小球藻(c．pyrenoidosa)、椭圆小球藻(c．ellip— 4．6 soidea)和普通小球藻(C．vulgaris)等。小球藻含有mg／g细胞干重171，与万寿菊中的叶黄素含量接 丰富的蛋白质、维生素、类胡萝卜素、多糖和小球 近，这说明原壳小球藻是一种很好的规模化培养 藻生长因子等多种营养及活性成分，具有抗氧化、 材料。此外，该藻的培养繁殖技术已有较长的研究 抗肿瘤、提高免疫力和预防心血管疾病等生理功 历史17-81，本实验室已经建立了一种较好的原壳小 能，因而。通过特定的加工工艺可以将小球藻研制 球藻异养培养体系，最大干重生物量可达120矾J【9】， 成微藻保健片或胶囊、微藻精(营养液)，以及以微 这意味着原壳小球藻有望取代万寿菊等植物成为 藻粉为主要原料配合其它食品原料制成的保健与