利用SUMO表达系统高效可溶表达人白细胞介素15及其活性研究.pdf

SUMo 15 7 6~89 ~ 白福 良等 利用 表达系统高效可溶表达人白细胞介素 及其活性研究 第 期 doi:10.3969/j.issn.1000-484X.2013.07.004 利用 SUMO表达系统高效可溶表达人自细胞介素 15及其活性研究 白福 良 田 辉 牛泽杉 于引航 王文飞 周 兵 李德山 !东北农业大学生命科学学院生物制药教研室 哈尔滨 150030# 中国图书分类号 R915 文献标识码 A 文章编号 1000-484X2013#07-0689-05 $ % 15(rhIL-15 ~ O RT-PCR 摘 要 目的 探讨重组人白细胞介素 的表达条件 纯化工艺并进行生物活性鉴定 方法 采用 15(hIL-15 cDNA, pSUMovector , rpSUMohIL-15 方法从正常成人外周血淋巴细胞中扩增出人白细胞介素 克隆到 中 构建 重 O , , ~ ~ O 组质粒 将转化重组质粒 的工程菌诱导表达 超声破碎后取菌液上清 经过亲和层析 酶切 亲和层析得到成熟蛋白 高效液 ; rhIL-15 T ~rhIL-15 NK ; 相色谱进行纯度分析 利用 促进 细胞增殖 诱生的 细胞杀伤肿瘤细胞的能力鉴定其生物活性 荷瘤 鼠实 rhIL-15 O rhIL-15, 14.4kD, 95% , T 验研究 抗肿瘤作用 结果 经纯化后得到 其分子量大小为 蛋白纯度在 以上 具有显著刺激 细 NK O O 胞增殖和 细胞杀伤肿瘤细胞效果 动物实验结果显示其具有明显的抗肿瘤作用 结论 经过纯化获得高纯度和高生物学 活性的 rhIL-15, NK ~ T , 且具有明显增强 细胞杀伤 刺激 细胞增殖和抗肿瘤 的活性 为细胞 因子联合其他方法治疗肿瘤等疾病 提供 了实验基础 O $ % rpSUMohIL-15; ; T ; NK ; 关键词 融合蛋白 细胞增殖 细胞杀伤活性 抑制肿瘤作用 UseoftheSUMOexpressionsystemtoefficientlyexpressthesolublehumanin- terleukin-15andtheactivitystudy bAIFu-Liang , TIANhui, NIUZe-shan , YUYin-hang , WANGWen-Fei, ZhOUbing , Lide-shan.