抗氧化剂对猪苓菌丝形成菌核的影响.pdfVIP

254 中国医药生物技术 2013 年 8 月第 8 卷第 4 期 Chin Med Biotechnol, August 2013, Vol. 8, No. 4 DOI:10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2013.04.003 ·论著· 抗氧化剂对猪苓菌丝形成菌核的影响 邢咏梅，李红莲，郭顺星 【摘要】 Sclerotium rolfsii 菌核的形成过程伴随着高度的脂 目的 旨在考察抗氧化剂维生素 C （Vc ）及 NADPH 氧化 质过氧化反应的发生。在随后的研究中，植物病 酶抑制剂 apocynin （Apo ）在营养琼脂培养基中对猪苓菌丝 原真菌菌核的形成被认为是由氧化应激触发形成 形成菌核的影响，并探讨抗氧化剂对猪苓菌丝形成菌核过程 的[4] 。生物体内产生的活性氧包括：过氧化氢 中活性氧产生的影响。 （H 1 O ）、单线态氧（ O ）、羟自由基（·OH ）、超 2 2 2 方法 将不同体积的 Vc 母液分别加入到灭菌后冷却至 氧自由基（O2– ·）等。药用真菌猪苓菌丝形成菌核 60 ℃ 左右的麦芽糖琼脂培养基中，使 Vc 在培养基中的终 过程中是否伴随 ROS 的变化以及抗氧化剂对猪 浓度分别为 0.5 、1.0、2.0、5.0、10、15 mg/ml。将 Apo 配 苓菌丝形成菌核的影响值得探讨。 制成 100 mmol/L 的母液，加入到灭菌后冷却至 60 ℃ 左 右的麦芽糖琼脂培养基中，使其在培养基中的终浓度分别为 1 材料与方法 10、20 、40 mmol/L 。通过猪苓菌核生物量来评价抗氧化剂 1.1 材料 对猪苓菌核形成的影响；利用 NBT 还原法检测猪苓菌核形 1.1.1 实验菌株 本实验所用猪苓采自山西古县 成过程中菌丝及菌核内活性氧的含量。 北平镇党家山村，由中国医学科学院药用植物研究 所郭顺星研究员分离鉴定，保存于麦麸琼脂培养基 结果 低浓度（0.5 mg/ml ）的 Vc 组能够促进猪苓菌丝生 中。 长并促使猪苓菌丝形成菌核，菌核生物量为（1.69 ± 0.06）g/ 1.1.2 试剂 麦芽糖、 K HPO 、KH PO 、 20 g 基质，与不添加 Vc 的对照组[菌核生物量为（1.55 ± 2 4 2 4 MgSO ·7H O、维生素 B 、琼脂粉等购自北京科百 0.10 ）g/ 20 g 基质）]相比，所诱导产生的猪苓菌核生物量 4 2 1 奥生物科技有限公司。 无显著性差异（P 0.05 ）；终浓度为 5.0 、10、15 mg/ml 的 1.1.3 主要仪器 SP-752 紫外可见光分光光度 Vc 组对猪苓菌丝生长及菌核形成均具有抑制作用。任一浓 计购自上海光谱仪器有限公司；除菌滤器、微孔滤 度的 Apo （10、20 、40 mmol/L ）均使猪苓菌丝生长明显减 缓，并且不能诱导猪苓菌核形成。 膜（孔径 0.22