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首届全国妇产科药学大会 ◎暨生殖内分泌药物与临床学术研讨会 论文交流 促性腺激素及其检测方法的发展 梁敏怡‘1 有限公司 一、促性腺激素的发展 二十世纪三十年代早期，人们已经意识到，以正常人类生殖周期为特征的卵巢序列性变 化是由垂体和卵巢密切关系控制着的。在垂体促性腺激素的刺激下，成长的卵泡产生诱导子 宫内膜生长的雌激素。FSH于LH一起诱导卵泡成熟的最后阶段，排卵及卵泡残留物转形成一 个功能性黄体。 对促性腺激素在正常卵巢周期中的生理作用的认识，使得许多科学家取得促性腺激素提 取物，充分提纯后用于因促性腺激素不足而患有生殖障碍的病人。1930年，德国科学家从猪 垂体提取的促性腺激素生产出来并用于临床；后来妊娠马血清促性腺激素(PMSG)开始用于 研究及临床，PMSG及其他动物来源的垂体促性腺激素制剂应用了30多年(1930至01967年)。 过去的40年中，促性腺激素药物生产上取得了众多进展(表1)。这些进展首先始于证 明了促性腺激素可以从绝经期妇女的尿液中提取…。这些工作使第一种尿源性促性腺激素 药物HMG于1962面市他1。HMG属于尿促性腺激素类，含有1：l固定比例的FSH和LH。但是，这 种药物制剂相对不纯，促性腺激素总含量约为2—5％旧’。HMG的生产过程需要庞大尿液收集 网，因为约2升尿液才能提取出75IUHMG． 二十世纪80年代，大规模的体外受精(IVF)项目应用了从不孕症患者排卵诱导中取得 的经验及相关理论。有关生理性过度刺激的知识帮助制定方案，通过利用药理学剂量的促性 腺激素，取得多个卵泡生长(控制性超排卵)，产生许多卵子用于体外受精。纯化的尿FSH u～FSH(尿促卵泡素)开始在市面上销售，尿促卵泡素是从绝经期妇女的尿液中提取的促性 腺激素制剂，绝大部分为FSH活性，仅含少量LH活性(IlU)它源自绝经促性腺激素，经过 进一步的提取和纯化，将FsH经化学吸附到琼脂糖柱的单克隆抗体上。富含LH的部分流出后 丢弃，富含FSH的部分经免疫洗脱柱制备。在这个过程结束时，尿促卵泡素含85％一100％的 FSH初始活性，仅极少LH活性。特异活性为150IUFSH／mg蛋白质，但仍有95％以上的蛋白质时 杂质蛋白。’。因此尿促卵泡素用于许多促排卵诱导方案或IVF项目。1993年出现了u—FSH—HP (高纯度尿促卵泡素)，与绝经期促卵泡素和尿促卵泡素的150IU／mg蛋白质FSH特异活性相 80 首届全国妇产科药学大会 暨生殖内分泌药物与临床学术研讨会 论文交流 比，它的FSH含量为95％¨’，特异活性为90001U／mg蛋白质，其特异活性增加T60倍，这是 通过采用生物纯化技术取得的(如在免疫吸附色谱分析过程中应用抗FSH单克隆抗体从大量 hMG中吸收FSH)。制剂的高纯度意味着每批产品可以用理化方法进行控制，从而降低批间差 异。高纯度尿促卵泡激素的上市代表着一个巨大的进步，导致产品需求剧增上升。但由于其 最终来源仍是绝经期妇女的尿液，仍需面临原料的供给和质量问题。 重组DNA技术的发明幅’提供了另一种生产复杂蛋白质的方法。这种情况下，将编码天然 蛋白质的DNA引入一个细胞的基因组。有遗传结构的细胞系就会成为编码蛋白质的永恒来源。 DNA技术通过细胞发酵和高尖的纯化技术使许多高纯度的治疗蛋白得以开发。制药公司很快 就用DNA技术开发和生产了重组DNA源蛋白质(1982年，重组胰岛素得至OFDA批准)。由于结 构复杂，FSH等促性腺激素产品的生产仍是一个特殊的挑战。虽然1985年已经首次合成了人 类FSH，但又用了3年的时间，采用中华仓鼠卵巢细胞后才使整个生产系统经济可行。纯型 r—hFSH首次得到完全确认∞’。另外，分析方法的发展也使整个生产过程中能更广泛评价产 品。1995年，首个r—hFSH上市，并被分类为促卵泡素Q∽’，随后第二个r—hFSH旧’上市。分 subunits) 析试验可用于测定纯度，定量所有生产批次的聚合物、分离亚单位(dissociate 及氧化Q亚单位和糖基化和同源异构体形式㈨…。 +在制药公司研发出重组的hCG之前，尿液提取物绒毛膜促性腺激是市场上主要含hOG活性 的促性腺激素产品，和尿促性腺激素一样，u—hC