中枢神经系统疾病基因治疗研究进展.pdfVIP

中枢神经系统疾病基因治疗的研究进展 予艮博爱河南省郑州大学第一附属医院神经内科(河南450052) 基因治疗(Gene ther印y)是指在基因水平上进行操作而达到治疗疾病的所有方法。近年来，基因治疗 作为一种全新可行的治疗战略正开始进入临床试验，其治疗范围不断扩大，其从实验室到临床应用的速度 大大超过了人们的预想。本文讨论当前中枢神经系统疾病基因治疗基础研究的有关问题，并提出展望。 l 中枢神经系统疾病基因治疗的途径 1．1 体外途径(exviV0途径)体外途径即体外细胞介导法，首先将外源治疗性基因克隆至一个合适 的载体，导入体外培养的自体或异体靶细胞，经筛选后将能表达外源基因的靶细胞移植入中枢神经系统内， 其实质是遗传修饰细胞的脑移植，是基因转移技术和脑内移植技术的结合。这种方法比较经典、安全，效 果较易控制，但操作步骤多、技术复杂、难度大，若采用人类胚胎细胞则涉及伦理学问题，不易推广。 1．2体内途径(inviv0途径)体内途径即在体靶细胞转染，不需体外靶细胞培养，将含有外源性治疗基 因的重组病毒、脂质体或裸露的DNA直接导入中枢神经系统内lzJ。体内途径的方法操作简便，实用性强， 容易用于临床，这类方法尚未成熟，存在疗效短，免疫排斥等问题，但其已成为目前中枢神经系统基因转 移的主要研究方向，只有体内方法取得成功，中枢神经系统基因治疗才能走向临床。体内途径有两种方法 可将外源基因导入宿主靶组织：一是非病毒介导途径即通过物理法、化学法或融合法直接将目的基因导入 体内。其具有安全、操作简单、插入容量不受限制及可通过物理方法实现靶向性转移(如基因枪)等优点。 但是直接导入的DNA通常难以整合入基因组，基因表达存在不稳定性，且在非分裂细胞中基因的转染效 率不高，使其应用受到限制。因此目前的研究多集中在另一方法：病毒载体介导途径即通过构建复制缺陷 ’ 的重组病毒将靶基因引入体内。 2 中枢神经系统疾病基因治疗概况 2．1脑血管病的基因治疗 基因治疗为改善脑血管病的预后，促进神经功能的恢复提供了新的思路。研究表明。脑缺血再灌注时， 神经元能有效地转染和表达外源基因，显示了基因治疗脑血管病的巨大潜力。基因治疗的目的包括：促进 血管内皮增生、形成新生血管、抑制炎症反应和自由基等的毒性作用及抑制细胞凋亡等，从而保护神经元。 码p一半乳糖酐酶的腺病毒载体注入同侧非缺血区、缺血周围区、缺血区、和对侧大脑皮质，并于7天后 用激光多普勒血流仪测量脑血流量，测定转基因的表达。结果发现，转染基因在非缺血区和缺血周围区表 白细胞介素一2分泌信号序列；在脑脊液种可检测到bFGF，并且诱导大鼠脑血管生成；有分泌信号序列的 表面形成新生血管。另有实验表明，将带有白细胞介素一l受体拮抗剂(IL．1ra)基因的腺病毒载体注入小 脑组织水肿明显减轻，梗死体积明显减小，多核白细胞的浸润明显减少，说明lL-lm的表达可减轻脑损伤。 2．2神经系统变性疾病的基因治疗神经变性疾病是神经系统多发的一类疾病，多无有效的治疗方 法，基因治疗技术的发展为这类疾病的有效治疗提供了广阔的前景。 PD是中老年常见的神经系统变性疾病，目前对基因治疗PD的研究主要集中在两个方面：(1)通过引 入多巴胺合成酶，提高纹状体内多巴胺含量； (2)通过引入潜在的神经保护分子，阻止多巴胺能神经元 死亡。促进受损的黑质纹状体系统重建和功能恢复，可从根本上治愈该病lsl。转入TH基因的前体成纤维细 胞移植入帕金森动物模型脑内，改善了多巴胺能纤维的变性和缺失情况，并且这种保护作用一直持续到第 8周：带有TH基因的星形胶质细胞移植对大鼠帕金森模型有同样的保护作用【9】。另一方面通过对黑质多巴 胺能神经元的保护，使黑质纹状体多巴胺系统得以完整保存，同样可以达到有效治疗的目标。目前研究较 cell derived line 多的保护因素主要集中在各种神经营养因子，尤其是胶质细胞源性神经营养因子(gliaJ f缸tor，GDNF)，其是目前发现的一种对多巴胺能神经元具有相对特异营养活性的神经营养因 neurorophic 活，并提高脑的多巴胺递质水平。然而另有研究显示表达多