GBSSIP-glgC嵌合基因马铃薯体内表达研究.pdf

摘 要 转基凶植物的出现为改良和选育出高产作物品种开辟了一条新的道路．其中利用基因转化改 良淀粉品质是植物转基因研究的热点之一。马铃薯块茎淀粉因其直链和支链分子多聚度高，淀粉 粒大小差异大等原因其水溶液的粘度高于玉米和小麦，因而被广泛应用于纺织，建筑，石油开采 等领域，但其淀粉含量低已成为了限制淀粉加工产业发展的瓶颈。 腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(ADP—glucose 中催化磷酸葡萄糖和PPi反应生成糖原或淀粉生物底物ADP-葡萄糖，该反应是淀粉生物合成的限 速酶：研究显示，植物AGPase对晷夜周期调控敏感，在玉米中表达大肠杆菌编码AGPaSe的幽筘 基因，可提高其淀粉合成量。 为了通过提高AGPase活性增加块茎淀粉含量，同时相对提高支链淀粉含量，本实验室用大肠 和pC-gpg，但其马铃薯体内表达尚未完成。 本研究利用农杆菌介导的转基因方法，将目的重组基因转化马铃薯体内，获得转基因马铃薯 抗性苗93株。抗性苗经过PCR的检测，获得33株阳性结果。PCR检测阳性的转化子的茎段进 行GUS组织化学染色结果显示，GUS基因在12株转化子的茎段巾得到表达。 以GUS染色阳性转化子的基因组DNA为模板，以地高辛标记的gtgC基因的PCR产物为探 针做Southe