艾灸预处理对大负荷训练运动员Th1%2fTh2失衡的调节作用.pdfVIP

特征性细胞因子，IFN- γ和IL-4又是一对相互调节因子，检测运动中IFN- γ和 IL-4的变化，被广泛应用为Th1/Th2失衡的评价指标，反映机体的免疫平衡状态。 本研究以大负荷训 阶段中长跑运动员为研究对象，根据运动训 实际，将传统 医学中“艾灸疗法”和“治未病”理论相结合，制定与之相适应的“艾灸预处理” 防治方案，在大负荷训 早期阶段 开始干预，研究艾灸预处理对大负荷训 期 间运动员的Th1/Th2失衡的调节作用，有望给运动性免疫机能失衡带来新的治疗 方法，并为艾灸预处理方法在竞技体育运动训 中的应用和推广提供客观的实验 数据。 1 对象和方法 1.1 实验仪器和试剂 仪器：实时荧光定量PCR 仪 （Rotor-Gene RG 3000，澳大利亚Corbett 公 司）；高速冷冻离心机 （Centrifuge 5417R，德国EPPENDORF 公司）；752 紫外 分光光度计 （上海第三分析仪器厂）；可调式微烟艾灸器 （广西桂林市绿竹生物 科技有限公司）;放射免疫计数器(GC-911，科大创新股 有限公司）。 试剂： 血红细胞裂解液（BECKMAN COULTER）；Sybr green 荧光染料（TAKARA 生物技术公司）；Trizol 试剂盒、鼠白血病病毒逆转录酶试剂盒 (M-MLV RT， 200U/ μL)、RNA 酶抑制剂 (RNA sin， 40U/ μL) （均为invitrogen 公司）；脱 氧核糖核苷三磷酸 ( dNTP，each 10 mmol/L)、100μmol/L 随机引物、焦碳酸二 乙酯 （DEPC）（均为上海申能博彩生物技术公司）；引物由上海英俊生物技术有 限公司合成；碘[125I]睾酮放射免疫分析药盒、皮质醇放射免疫分析药盒 （北京 北方生物技术研究所）。 1.2 研究对象 上海体育学院训 中心中长跑男子运动员12 名，均身体健康，采用SAS 软 件进行随机化分组，对照组 （6 名）和观察组 （6 名），两组年龄、身高、体重等 基线情况相比，差异均无统计学意义 （P0.05），具有可比性。 1.3研究方法 （1）运动员干预方法和训 计划 观察组，实验期间正常生活和按照训 计划训 ，并在每天下午训 后，运 用艾灸预处理方法进行预防性干预治疗； 537 对照组，实验期间同观察组一样进行正常生活和按照训 计划训 ，但不进 行任何形式的干预治疗。 ①艾灸预处理方法 穴位处方：①关元穴、足三里穴；②关元穴、三阴交穴。定穴方法参照普通 高等教育 “十一五”国家级规划教材 《经络腧穴学》 （沈雪勇主编.中国中医药 出版社,2007）。操作方法：实验组每天下午训 后，6：30～7：30，进行穴位 艾灸预处理预防治疗，上述①和②两组穴位交替治疗，每天灸一组；运用可调式 微烟艾灸器，内置 20×33mm纯艾条，分别置于上述穴位上温和灸刺激；治疗 过程中，调节艾灸器的调温螺丝，使艾灸温度以患者感觉舒适为度，灸后腧穴局 部皮肤成淡红色红斑为佳；每天1次，每次30min，每周治疗6次，星期日休息； 从大负荷训练周开始至调整训练周结束，共灸治四周。 ②训 计划 根据主教 制订的 年训 计划，在年度训 计划中准备期的大负荷阶段训 进行实验。大负荷阶段训 计划安排如下：第1 周为适应训练周，第2～4 周 为大负荷训练周，第5 周为调整训练周；每天训 2 次，每周训 6 天，周日 休息，共 12 次，其中大课3 次，中课5～6 次，小课3～4 次；一次训 课准备 活动 20～30min、正式训 80～90min、整理活动 20～30min；训 内容包括耐 力、速度、中长跑专项身体素质等。 （2） 测试指标与方法 ①取静脉血：分别在第1周末 （大负荷运动训 前），第4周末 （大负荷运动 训 3周后）、第5周末 （调整训 1周后），均在周日清 6：30～7：00，运动 员空腹、安静状态下，抽取静脉血4mL，2mL不抗凝，3000r/min离心10min分离血 清分装，－20℃保存，检测血睾酮和血皮质醇；2mL加入肝素钠抗凝试管，加入 红细胞裂解液， 解 血中的红细胞后，离心1500r/min，10min，去上清，加入 1mL Trizol，混匀，转至1.5mL离心管中，制备成白细胞沉淀保存于－80℃储存 备用，检测IFN- γ和IL-4细胞因子mRNA 的表达量。 ②血睾酮 （T）、血皮质醇 （Cort）检测：以放免法