脓毒血症患者血液分离金黄色葡萄球菌毒素基因的检测.pdfVIP

． 3018． 壅堕 ! 箜 鲞笙 !塑 ! ! !竺!! ! ： !：!： ：!：! 脓毒血症患者血液分离金黄色葡萄球菌毒素 基 因的检测水 陈吟霜 ，周帅 ，杨镒宇 ，谢永强。，钟华敏。，黄莲芬。，姚淑雯 ，周珍文 广州医科大学研究生院(广州510182)；广东省广州市妇女儿童医疗 中心 ICU，检验科(510120) 【摘要】 目的 了解脓毒血症患者金黄色葡萄球菌(sA)血液分离株毒素基因的携带情况。方法 对从临 床标本分离出的50株 sA，设计特异性引物，PCR扩增 sea、tsst一1、eta和hlg毒素基因。结果 50株 sA中有44株 携带以上毒素，占88％，各基因携带率分别为sea42％(21／50)、tsst一152％(26／50)、eta30％(15／50)、hlg22％ (11／5o)，同时携带2种及2种以上毒素的占44％(22／50)，其中11株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)毒素携 带率为 100％(11／11)，以sea为主，占90．91％(10／11)，甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)39株毒素携带率 79．49％(31／39)，以tsst一1为主，占48．72％(19／39)。结论 I临床脓毒血症患者sA大部分携带毒素，MRSA的带 毒率高于MSSA，表明MRSA致病性及毒性高于MSSA，临床需重视 MRSA监控 ，合理使用抗生素，有效控制院内 感染。 【关键词】 金黄色葡萄球菌；毒素基因；耐甲氧西林金色葡萄球菌 金黄色葡萄球菌 (staphyr[ococcusaureus，SA)是最 患儿，无重复菌株。其中男2l例 ，女 29例 ，年龄 3个 常见院内感染病原菌之一，其感染率居高不下，特别是 月至 11岁，平均 (6．58±1．84)岁，分别来 自风湿免疫 耐甲氧西林金黄色球菌 (MRSA)的出现和传播使其 已 科4例 、ICU病房 24例、呼吸内科 10例、耳鼻喉科 2 成为一个世界性的公共卫生问题 。脓毒血症是由感 例、肾内科 1例，皮肤科 2例 ，感染科3例 ，消化科 1 染引起的全身炎症反应综合征，其发病率及病死率较 例，普通外科3例。血液标本均为患儿高热发病时抽 高，合并感染性休克者的病死率可高达80％ 。sA为 取送检 。 引起脓毒血症的主要病原菌之一 ，SA的致病与其分泌 1．2 试剂与仪器 SADNA提取试剂盒、dNTP、1000 的各种毒素有重要的关系，其中肠毒素、中毒性休克毒 bpMaker、rTaq酶购 自Takara公司。上海力 申HFs— 素、剥脱毒素及溶血毒素等毒素基因与各疾病的产生 ryl200型生物安全柜，德国Biometra公司PCR仪，德国 尤为密切 ，因此对临床分离的sA进行相关毒素基 Sorval公司 micro17R 台式高速冷冻离心机 ，英 国 因的检测有重要的临床意义。目前很多的研究者比较 Uvitec公司 GAS7508一T20紫外凝胶成像分析系统。 关注的是SA中肠毒素基因分型的检测 ，不少的研究者 法国梅里埃公司GP67药敏卡、药敏用生理盐水 、比浊 也集中于对SA中MRSA和甲氧西林敏感金黄色葡萄 仪。美国BD公司BD9120型全 自动血液培养仪。其 球菌(MSSA)各致病毒素基因的检测，但他们检测的 他培养试剂购 自鼎国公司。 SA菌株普遍都是不分年龄段、不分疾病与菌株来源部 1．3 引物合成 所有引物均由上海英潍捷基贸易有 位的，而在本研究中我们从广州市妇女儿童医疗中心 限公司合成。引物序列见表 1。 儿童脓毒血症感染者中分离了50株 SA，检测了肠毒 表 1 SA毒素基因引物及序列 素A(staphylococcalenterotoxinA，sea)、中毒性休克毒 素一I(toxicshocksyndrometoxin1，tsst一1)、剥脱毒 素A(exfoliativetoxinA，eta)、一溶血毒素 (gammahe— molysin，hlg)4个毒素基因的携带情况 ，为 sA的防控提 供理论依据。 1