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生物活性玻璃离子液对成骨细胞增殖的实验研究 中文摘要 生物活性玻璃离子液对成骨细胞增殖的实验研究 中文摘要 第一部分生物活性玻璃离子液对成骨细胞培养中的形态学特 征变化的观察 l摘要l目的通过在培养液内加入生物活性玻璃离子液，观察成骨细胞培养过程中 成骨细胞的形态学特征的变化，以了解生物活性玻璃对成骨细胞生长的影响。方法 将生物玻璃晶体溶于DMEM培养液内，37(2水浴24小时过滤除去晶体，测定其内的 Na、Ca、P、Si四种离子的浓度变化。以DMEM完全培养液作为对照组培养液，以 加入生物活性玻璃离子液的DMEM完全培养液作为实验组培养液。取人松质骨源性 成骨细胞和乳鼠颅骨源性成骨细胞，分别用完全DMEM培养液培养，观察成骨细胞 生长形态。取第二代成骨细胞以对照组和实验组培养液分别培养，观察成骨细胞生长 过程中大体形态差异、细胞超微结构(粗面内质网、核糖体、线粒体)的差异、细胞 生长曲线0VlTT比色法)的差异。结果Si离子的浓度在实验培养液内是对照培养液 差异(pO．05)。对照组与实验组的大体细胞形态学比较：在培养48小时后可见到实 验组人成骨细胞整体体积较大；实验组成骨细胞超微结构内比对照组有较多的粗面内 质网和线粒体和核糖体；细胞生长指数在培养第2天时即出现明显的差异(pD．01)， 实验组成骨细胞比对照组的生长曲线陡峭。结论生物活性玻璃离子液有促进成骨 细胞增殖的形态学特征。 【关键词】生物活性玻璃成骨细胞形态学 第二部分生物活性玻璃离子液对成骨细胞生长周期的影响 生物活性玻璃离子液对成骨细胞增殖的实验研究 中文摘要 [摘要]目的通过在培养液内加入生物活性玻璃离子液，观察成骨细胞生长周期的 变化。方法 以DMEM完全培养液作为对照组培养液，以加入生物活性玻璃离子液 的DMEM完全培养液作为实验组培养液，取第二代人松质骨源性成骨细胞用DMEM 完全培养液培养6天，测定成骨细胞生长周期；成骨细胞分别用两种培养液培养1．6天， 流式细胞仪测定每天成骨细胞G卜s、G2期的百分比；对细胞增殖活性指标SPF(s期 细胞比率)和PI(增殖指数)进行比较。结果人成骨细胞生长周期约4天，细胞周 期的百分比变化情况在1—4天内进行对比有意义，实验组在培养48／J、时时细胞的SPF 指数才达到高峰。结论生物活性玻璃离子液能改变人成骨细胞的生长周期，推测生 物活性玻璃对人成骨细胞的周期影响是通过数种基因的激活，调控成骨细胞的G。期缩 短，细胞生长增快，通过S期快速进入了G2M期，细胞分裂提前，细胞周期缩短，结果 加速细胞增殖，促进临床骨修复。 【关键词1生物活牲玻璃．捌撑}}阻媳细胞周期 第三部分生物活性玻璃离子液对成骨细胞细胞因子表达 的影响 【摘要】目的通过成骨细胞的培养，观察生物活性玻璃离子液对成骨细胞分泌的细 胞因子的影响，以进一步探讨生物活性玻璃促进成骨细胞增殖的可能机制。方法以 DMEM完全培养液作为对照组培养液，以加入生物活性玻璃离子液的DMEM完全培 养液作为实验组培养液，取第二代人松质骨源性成骨细胞和乳鼠颅骨源性成骨细胞， 以对照组和实验组培养液分别培养4天，收集培养的成骨细胞抽提RNA，将RNA逆 转录成cDNA，用聚合酶链式反应(PCR)体外扩增DNA，荧光定量检测人成骨细胞 表达的细胞因子：I型胶原(collagen-I)、骨钙素(bone gla-protein，BGP)、成骨细 factor I)、类胰岛素样生长因子II 胞特异转录因子(core．bindingalpha-1，CBFA II 生物活性玻璃离子液对成骨细胞增殖的实验研究 中文摘耍 I= 钙化：生物活性玻璃促进成骨细胞分泌CBFAI、IGF-2，促进