第章单抗与基因工程抗体.pptVIP

* 临床免疫学与免疫学检验 * ㈠含Fv 段的抗体融合蛋白 Fv-毒素、酶、细胞因子 ㈡嵌合受体 ScFv-TCR的α、β链C区 ㈢含Fc的抗体融合蛋白 CD4-Fc；TNF-Fc * 临床免疫学与免疫学检验 * 四、双特异性抗体（BsAb） 又称双功能抗体：是将特异性不同的两个小分子抗体连接在一起则可得到双特异性抗体（即一个抗体分子中的两个抗原结合部位可分别结合两种不同的抗原表位）。双特异性抗体分子片段可从Fab、Fv或ScFv组建， * 临床免疫学与免疫学检验 * ㈠种类：化学交联、细胞工程、基因工程 ㈡ 双特异性抗体分子的应用  1、在免疫检测中的应用 2、在肿瘤放射免疫显像中的应用 3、肿瘤导向治疗 * 临床免疫学与免疫学检验 * 第四节 单克隆抗体的应用 一、检验医学诊断试剂 病原微生物抗原、抗体的检测 肿瘤抗原的检测 免疫细胞及其亚群的的检测 激素测定 细胞因子的测定 二、蛋白质的提纯 三、肿瘤放射免疫显像及肿瘤导向治疗 * 临床免疫学与免疫学检验 * 大纲要求 掌握：McAb 及基因工程抗体的概念；杂交瘤技术的基本原理及 HAT 培养基的筛选机制。 熟悉：制备单克隆抗体的基本技术；单克隆抗体在医学中的应用；基因工程抗体的种类 了解：单克隆抗体技术的研究进展。 * 临床免疫学与免疫学检验 *       思考题： 1、单克隆抗体的优点有哪些？ 2、叙述杂交瘤技术制备单克隆抗体的三个基本原则 。 3、叙述B淋巴细胞杂交瘤技术的基本原理及主要步骤。 4、简述细胞DNA合成的两条途径。 5、应用HAT培养基作为杂交瘤技术的选择性培养基的原理是？ 6、简述基因工程抗体的种类。 * 临床免疫学与免疫学检验 *  临床免疫学与免疫学检验 2003年2月 * 第四章 单克隆抗体与基因工程 抗体的制备 教师 袁桂峰 临床免疫学及免疫学检验 * 临床免疫学与免疫学检验 * 1975年Kohler 和Milstein首先通过细胞杂交技术获得抗SRBC的单克隆抗体，1984年获诺贝尔医学奖。 多克隆抗体（Polyclonal antibody ,PcAb) 单克隆抗体（monoclonal antibody ,McAb）是指由单个杂交瘤细胞增殖而成的细胞克隆产生的，针对某一抗原决定簇的、完全均一的、单一特异性的抗体。 * 临床免疫学与免疫学检验 * 优点：结构高度均一，其抗原结合部位和同种型都相同；纯度高、特异性强、效价高、少或无血清交叉反应等特点。广泛应用：诊断试剂、抑制剂、导向药物。 缺点：鼠源性，限制人体内应用。 * 临床免疫学与免疫学检验 * 基因工程抗体（Genetical engineering antibody）：应用DNA重组技术和蛋白质工程技术在基因水平上对编码Ig分子基因进行切割、拼接与修饰等，并导入受体细胞（如大肠杆菌、酵母菌、哺乳动物细胞等），使之表达出新型抗体分子。 * 临床免疫学与免疫学检验 * 第一节 杂交瘤技术的基本原理 基本原理是根据以下三个原则：①淋巴细胞产生抗体的克隆选择学说，即一种（个）克隆只产生一种杭体；②细胞融合技术产生的杂交瘤细胞可以保持双方亲代细胞的特性；③利用代谢缺陷补救机理筛选出杂交瘤细胞并进行克隆化，然后大量培养增殖，制备所需的McAb 。 * 临床免疫学与免疫学检验 * 一、杂交瘤技术 杂交瘤技术的基本原理是： 特性种类 长期体外增殖 分泌抗体 HGPRT HAT培养基 小鼠骨髓瘤细胞 可以 不能 无 不能 免疫的小鼠脾细胞 不能 可以 有 可以 * 临床免疫学与免疫学检验 * 主要步骤： ㈠细胞的选择与融合 1、细胞的选择 抗原免疫的B细胞： 骨髓瘤细胞：B细胞系恶性肿瘤，特点①稳定，易培养；②