第章反转录病毒.pptVIP

HIV检测生物安全—二级生物安全 实验设备在运出修理或维护前必须进行消毒 人员暴露于感染性物质时，及时向实验室负责人汇报，并记录事故经过和处理方案 禁止将无关动物带入实验室 处理以下致病微生物时应在生物安全柜 (Ⅱ级) 中进行 ，包括: 高浓度 大容量 有喷溅可能性 上述材料的离心操作如使用密封的离心机转子或安全离心杯，且只在生物安全柜中开闭，可在实验室中进行。 Ⅱ级生物安全柜必须每年进行一次年度现场检测。 HIV检测生物安全—二级生物安全 安全设施和个体防护 安全设施和个体防护 当微生物的操作不可能在生物安全柜内进行时，须使用面部保护装置 应有相应的SOP HIV检测生物安全—二级生物安全 HIV检测生物安全—二级生物安全 安全设施和个体防护 在实验室中应穿着工作服或罩衫等防护服，不得穿着外出。用过的工作服应先在实验室中消毒，然后统一洗涤或丢弃。 当手可能接触感染材料、污染的设备时应戴手套。如可能发生感染性材料的溢出或溅出，宜戴两副手套。不得戴着手套离开实验室，工作完全结束后方可除去手套。一次性手套不得清洗和再次使用。 样品从一个实验室转送到另外一个实验室，必须是血清或血浆，除特殊需要外，一般不能用全血。 且需置于带有盖帽的试管内，防止样品流出，试管上应有明显的标记。清楚地标记为感染性材料（按所在生物安全防护实验室的级别标明相同的级别）。 感染性材料必须放在密闭的管子中，再放入含有足够吸水材料的生物危险管中，以防泄漏。将试管放入专门带盖的容器内，容器的材料要易于消毒处理，在所放试剂管周围上下均垫有软性物质，以免破碎，容器外表有HIV检测专用字样。如果路程较远或者气候炎热时，盛有样本的容器应至于4℃以下转运 样本的转送和发放 生物危险Ⅲ级 第一道包装 第二道包装 防渗漏包装 加入吸水层 外包装 实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于主要通过呼吸途径使人传染上严重的甚至是致死疾病的致病微生物及其毒素。通常已有预防的疫苗。 包含微生物举例 结核分枝杆菌 牛分枝杆菌 鼠疫杆菌 炭疽杆菌 Q热病原体 HIV (血清学检测除外) 澳大利亚立克次氏体 加拿大立克次氏体 HIV检测生物安全—三级生物安全 人类嗜T细胞病毒 RNA肿瘤病毒 HTLV-Ⅰ和HTLV-Ⅱ在电镜下呈球形: 核衣壳：核心：RNA与逆转录酶； 衣壳：含有P24和P18两种结构蛋白； 包膜： 刺突：糖蛋白 (gp120)，能与细胞表面 的CD4分子结合。 HTLV gag、pol、env 3个结构基因，功能与HIV基本一致 tax、rex 2个调节基因，除有增加病毒基因的转录和调节病毒基因产物表达作用外，尚能激活细胞的IL-2基因和IL-2受体基因的作用 HTLV-Ⅰ型和Ⅱ型的基因组的同源性约50%。 成人T细胞白血病(adult T-cell leukemia,ATL) ： HTLV-Ⅰ型引起，多为40岁以上的成人发病。T细胞大量增生，转化、癌变，淋巴结及肝、脾肿大，并发高钙血症、皮肤红斑、皮疹、结节等，预后不良。 HTLV-Ⅰ型相关脊髓病 (HTLV-Ⅰ associated myelopathy,HAM) 及热带痉挛性下肢轻瘫 (tropical spastic paraparesis,TSP)： HTLV-Ⅰ型引起，因两者相似，故总称HAM／TSP。HAM以女性居多，主要症状为慢性进行性步行障碍与排尿困难，有时伴有感觉障碍。用激素和IFN治疗可缓解。 HTLV—致病性 传播途径： 水平传播：可通过输血、注射、性交等方式 垂直传播：通过胎盘、产道和哺乳等途径在母 婴间。 HTLV—致病性 病毒分离与鉴定 采取患者新鲜外周血分离淋巴细胞，经PHA处理后，加入含有IL-2的营养液继续3～6w，然后用电镜观察细胞中的C型病毒颗粒，并检查细胞培养液上清的逆转录酶活性，最后用免疫血清或单克隆抗体进行病毒鉴定。 HTLV—微生物学检查法 抗体检测 1.ELISA法 用HTLV-Ⅰ/Ⅱ病毒作抗原，加患者血清孵育后再加酶标记的抗人IgG抗体，加酶底物视其是否显色来检测HTLV-Ⅰ/Ⅱ抗体。 2.间接免疫荧光法 以HTLV-Ⅰ/Ⅱ感染的T细胞株作靶