“通腑”对卵清蛋白致敏支气管哮喘小鼠模型的影响.pdfVIP

伞网第十九次仲景学说学术年会论文集 4h，持续7日。正常组及正常给药组则以蒸馏水腹腔注射及雾化吸入，连续7d。 1．2药物制各与给药 采用《伤寒论》大承气汤(大黄、厚朴、枳实、芒硝)为干预药物，中药材全部购自北京同仁 堂药店前门总店，经北京中医药大学中医药基础理论与关键技术研究中心鉴定，均为正品。参普通 高等教育“十五”国家级规划教材《方剂学》载大承气汤剂量(大黄129、厚朴249、枳实129、芒 硝99)依照人单位体重生药量进行小鼠药量，求得小鼠单位体重生药量，并扩大20倍，即199／kg。 药物以蒸馏水煎煮30min，提取2次。再合并煎液，并将所得药液用双层纱布过滤，水浴加热蒸发 浓缩，贮于冰箱中备用。 模型给药组及正常给药组动物，第14-20天每天1次灌胃给予大承气汤药液，0．4ml／只，正常 组及模型组同时给予等量蒸馏水，连续7d。各组于末次给药后，禁食12h后取材，检测相关指标。 1．3实验仪器与试剂 cmX30cruX40cm)， YC-Y800亚都医用雾化器(北京Ⅱ都科技股份有限公司)、动物雾化箱(20 自制、电子天平(YP3000型电子天平)；OVA(Grade 公司)。 1．4检测项目 1．4．1整体情况观察 实验过程中，观察小鼠整体情况，如呼吸、哮鸣音、腹肌抽搐、大小便等症状或体征。 1．4。2肺支气管肺泡灌洗(BALF)液细胞分类计数 手术剪切开颈部，暴露气管及肺脏，分离气管，结扎一侧主支气管，剪开左侧气管，将导管 插入气管内lcm固定，用无菌0．9％氯化钠溶液lml进行气管、支气管和左肺反复灌洗3次，确保 回收率在75％以上。将支气管肺泡灌洗液4C3000rm／in离心lOmin，取离心后沉淀物涂片，瑞氏 染色，进行细胞分类计数。 1．4．3肺组织病理学观察 各组取右肺中叶，用10％中性福尔马林液固定，石蜡包埋，切片厚4urn，每个标本连续切片4 张，分别进行HE染色，OYLMPUS光学显微镜观察肺组织形态学变化。 1．5统计方法 采用SPSSl7．O软件进行数据统计分析，结果以均数±标准差表示，多组均数比较用单冈素方差 分析法，标准水平取Q=O．05，以PO．05为差异有显著性意义。 2结果 2．1整体情况观察‘ 正常组及正常给药组小鼠整体情况良好，未见明显异常；雾化吸入OVA过程中，激发诱喘时可 观察到模型组小鼠出现剧烈咳嗽、打喷嚏、呼吸困难、喘息等；部分小鼠可闻及明显喘鸣音。模型 给药组小鼠亦出现呼吸急促、哮呜音、腹肌抽搐、大小便失禁等刚性反应，但程度较模型组减轻。 2．2 BALF中细胞分类计数 如表l所示：与正常组比较，模型组BALF中淋巴细胞、嗜酸性粒细胞和中性粒细胞比例均明显 升高(尸．O．01)；与模型组相比，模型给药组BALF中淋巴细胞、嗜酸性粒细胞及中性粒细胞比例均 明显降低(户O．05或PO．01)。正常纽与正常给药纽无显蒋性差异。 326 张暾医学求真·宴驶研究 05”p0 05“PO 注：与正常组比较’PO 0l；与模型组比较。PO Ol 2 3肺组织病理学观察 如目l所示光镜F可见，止常组及正常给药组小鼠肿组织结构完整、清晰，结构基本正常。模 型组可见支气管上皮损坏、肺泡周围充血，伴u淋巴细胞浸润。模型给药组可见支气管链变薄，无明 显炎症细胞浸润 锄懋麟 瓣妻≮强： 图1肺组织痛理学改变(HEX40) ^：正常组B：模型纽C：模lg给药组D：正常给药组 3讨论 支气管哮喘是临床常见痈、多发病，以多种炎症细胞(包括嗜酸性粒细胞、肥太细胞、T淋巴 细胞、中性粒细胞、气道上皮细胞等)参与的气道慢性仆特异性炎症，气道高反麻和慢性气道炎症 为基丰特征，其主要病理学改变是气道内大量炎性细胞浸润，其中以嗜酸性牲细胞肼多，其玖是淋 巴细胞，巨噬细胞干¨蟮中性粒细胞等。根据其‰床特征，支气管哮喘当属丁中医≯“喘证”、“哮证” 等病证