半制备色谱法分离巴戟天中的低聚糖.pdfVIP

第7卷第5期总第73期 O教FCHI育NA ◎寸!穗艇巍然。D远UCAT程ION 二oO九年五月·己丑年 半制备色谱法分离巴戟天中的低聚糖 黄裕1蒋兆健1周锦珂1杨中铎2 1中药提取分离过程现代化国家工程研究中心／广州汉方现代中药研究开发有限公司(510240) 2兰州理工大学(735050) 摘要：目的运用半制备色谱法分离巴戟天中的低聚糖。方法应用Gilson制各色谱仪．以PhenomenexSynergi半制备柱，甲醇·水=5：95 为流动相，流速5ml／min，柱温30℃，为色谱条件对巴戟天提取物进行分离。结果所得四聚糖耐斯糖纯度96．1％、五聚糖1．果呋喃糖基耐斯 糖纯度95．8％．结论此方法重现性好、简单易操作，可以应用于巴戟天中四聚糖和五聚糖的分离制备． 关键词：半制备色谱：巴戟天；耐斯糖；卜果呋喃糖基耐斯糖 文章编号I doi：10．3969／j．issn．1672-2779．2009．05．0361672-2779(2009)-05—0048-02 中药巴戟天是茜草科巴戟属植物巴戟天的根炮制 色谱仪，按样品保留时间进行分段收集，得到A、B、 而成的传统中药，具有补肾壮阳、强筋骨、祛风湿的 C、D四组份。重复进样lO次，合并相同保留时间段 功效【l】。研究表明，巴戟天中的低聚糖具有显著的抗 内的组份，把B、C组份分别减压浓缩至5ml、冷冻 抑郁活性[21。目前分离巴戟天中低聚糖的相关单体须 干燥，得两白色粉末状固体物。 经复杂的前处理、反复柱层析等多种手段联合应用， 2．4冷冻干燥取2．3项下B、C浓缩液，按以下方 如文献【56】采用液液萃取、透析、凝胶柱层析等。本 法进行干燥：①预冻干燥：药液置冰箱速冻至--30℃。 文作者在研究巴戟天中，经简单前处理，用半制备色 ②升华干燥：冻干机冷凝器降温至一40℃，抽真空至 10 Pa以下，保温2小时后升温到5℃，时间为8h，到 谱法一次分离得到四聚糖耐斯糖(nystose)和五聚糖1． 达5℃后保温3h；③解析干燥：5℃后升至30℃，时 果呋喃糖基耐斯糖(1．fructofuranosy．nystose)。 l仪器与试剂 间为3h。30℃后继续保温2h。收粉，得两份白色粉末 1．1仪器GilsonFC-203B制备色谱仪，半制备柱状固体物。 (Phenomenex mmX 2．5高效液相色谱检测【3】标准溶液的配置：分别精 Synergi，25010咖41．t)，分流 Alliance 器Dikma 密称取对照品耐斯糖、1．果呋喃糖基耐斯糖适量，加 Preparative／Flow—Splitter，Waters mill 甲醇定容，配制成0．4 2695液相色谱仪，分析柱(PhenomenexSynergi，250 mg·ml～、0．24mg·mld的混合对 X mill 4．6