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去细胞全肾生物支架的制备与鉴定.pdf

第43卷第2期 解 剖 学 报 V01.43,No.2 ·253· 2012年4月 ACTAANATOMICASINICA Apr.2012 去细胞全肾生物支架的制备与鉴定 张建色1 王辉2 邵培刚2 林贤丰2 彭蒙蒙2 薛向阳3 梅劲h (1.温州医学院人体解剖学教研室;2.温州医学院第一临床医学院;3.温州医学院微生物与免疫学教研室,浙江温州325035) [摘要】 目的通过灌注加浸泡法制备全肾细胞外基质支架.并对该生物支架进行鉴定。 方法健康成年 白酶溶液、I%十二烷基硫酸钠(SDS)溶液、I%TrltionX·100溶液以及含青、链霉素的PBS溶液。处理后,行DNA 定量与定性分析,透射电镜、HE染色及免疫荧光观察残留细胞核成分。进一步丙烯腈-丁二烯-苯乙烯树脂(ABS)铸 型观察肾内血管分布情况。 结果 去细胞组DNA含量较对照组下降了97%,琼脂糖凝胶电泳未见明显DNA条 带;透射电镜、HE染色及免疫荧光观察去细胞组保留了大量细胞外基质,未见明显细胞核成分残留;铸型标本显示 去细胞组血管较稀疏。分支完整、清晰。 结论联合酶消化法与去垢剂洗涤法,经灌注加浸泡法处理的全肾,可 有效清除肾内所有细胞成分,较好地保留细胞外基质支架和血管网络结构,是一种简单易行且较为理想的制备组 织工程肾生物支架的方法。 【关键词] 去细胞;肾;细胞外基质;血管铸型;组织工程;免疫荧光;大鼠 【中图分类号】 and ofawhole identification Preparation kidney decellularizedbio-derivedscaffold ZHANG Jinl· Jian.sel,WANGHui2,SHAOPei.gan92,LINXian—fen92,PENGMeng-men92,XUEXiang—yang’,MEI Medical First Medical (J.Department College;2.Depatrmemofthe Clinic,Weazhou ofAnatomy。乳mhau College; and Medwal Wenzhou 3.Department Immunology,WemtumCollege。Zhejiang325035,China) ofMicrobiology To awhole decellularizedextracellularmatrixbio-derivedscaffoldandtO [Abstract]Objecfiveprepare kidney identification.MethodsThe withuretersandrenalvesselswa5harvestedfromadultSDrats. performpreliminary kidney Intravenouscatheterswereinsert

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