犬流感病毒重组核蛋白抗体间接ELISA检测方法的建立.pdfVIP

第37卷第8期 中国预防兽医学报 V01_37．No．8 2015年8月 ChineseJournalofPreventive Medicine Aug．2015 Veterinary doi：10．3969／j．issn．1008-0589．2015．08．10 犬流感病毒重组核蛋白抗体间接ELISA检测方法的建立 李陆涛，袁子国，孙凌霜，涂黎晴，闰中山，李秀珍，李守军+ (华南农业大学兽医学院／广东省兽医临床重大疾病综合防控重点实验室，广东广州510642) 血清样品确定阴阳性临界值为0．288。该方法检测犬瘟热病毒、犬细小病毒、犬副流感毒、犬腺病毒II型、狂犬 病病毒、犬弓形虫、犬弓首蛔虫、犬复孔绦虫的阳性血清均为阴性，具有良好的特异性，但与H1N1、H3N8和 H9N2亚型CIV有交叉反应。该方法检测H3N2 批内批间变异系数为1．85％～6．57％，重复性良好。通过对H3N2CIV攻毒犬血清进行分析，表明该检测方法具 有滞后性，检测到CIV抗体的时间晚于HI试验。利用本研究建立的方法和以H3N2C1V为诊断抗原的Ⅲ检测方 法对450份血清样品进行检测，结果显示该方法对血清样品具有初筛作用，两者阳性符合率为58．3％，阴性符合率 为100％。本研究可以结合其它血清学方法为CIV流行病学调查进行快速、高效的检测。 关键词：犬流感病毒；重组核蛋白；间接ELISA 中图分类号：$852．65 文献标识码：A 1-04 文章编号：1008．0589(2015)08．061 ofanindirectELISAfor antibodies Development detecting against ofcanineinfluenzavirus nucleoprotein LI Lu-tao，YUAN Xiu—zhen，LI Zi—guo，SUNLing-shuang，TULi—qing，YANZhong-shan，LI Shou-jun‘ Provincial ofPreventionandControlforSevereClinicalAnimal of Laboratory Diseases，CollegeVeterinaryMedicine， (GuangdongKey SouthChina AgriculturalUniversity，Guangzhou510642，China) Abstract：Inorderto detectserum canineinfluenza indirectELISAwas rapidly antibodyagainst virus(civ)，an developed withthe recombinantNP ofH3N2CIVas reactionconditionsoftheELISAwere purified protein coatingantigen．The optimized andthecut-offvalueofthe wassetas0．288determined10SPFcanineserum