菲涅耳反射型光纤生物传感器研究研究报告.pdfVIP

第 43卷 分析化学 (FENXIHUAXUE) 研究简报 第 6期 2015年6月 ChineseJournalofAnalyticalChemistry 899—903 DOI：10．11895／j．issn．0253-3820．141068 菲涅耳反射型光纤生物传感器研究 俞文杰 郎婷婷 赵春柳 周雨萌 王小明 杨 畅 。(中国计量学院光学与电子科技学院，杭州 310018) (浙江大学光电信息工程学系，杭州 310027) 摘 要 构建了一种基于菲涅耳反射原理的光纤生物传感器 ，以生物素一链霉亲和素体系为模型验证了其进 行生物传感的可行性。首先，利用硅烷偶联剂，在切平整的普通单模光纤端面修饰上生物素，将其作为吸附链 霉亲和素的生物敏感膜。然后 ，将光纤端面浸入不同浓度的链霉亲和素溶液中，测量宽带光源经过光纤端面 反射后的光谱。实验结果表明，反射光谱的相对功率与链霉亲和素溶液浓度之间呈线性关系，测量得到灵敏 度为 15．38dB／(ms／mL)。用牛血清 白蛋白代替链霉亲和素，测量得到的反射光谱曲线与在之前浸入生物素 后的反射光谱曲线基本重合 ，证明此生物传感器的选择性好。最后以人免疫球蛋白G与山羊抗人免疫球蛋 白G体系验证了此结构进行生物传感的实用性。 关键词 菲涅耳反射；光纤生物传感器 ；生物素-亲和素；硅烷偶联剂；免疫球蛋白G 1 引 言 以生物活性单元 (如酶、抗原抗体、核酸等)为生物敏感元，用光纤来传导和收集光信号进行生物检 测的传感器统称为光纤生物传感器，它集成了光纤传感器具有的灵敏度高、抗 电磁干扰能力强、耐腐 蚀…等优点，也集成了生物传感器特异性强 的优点。文献报道的光纤生物传感器有倏逝波型_3j、荧 光型 和光吸收型 等，这些传感器表现出较好的可靠性 ，但也存在着一些缺点，如倏逝波型需要对光 纤包层进行腐蚀或者抛磨处理，使整体结构受机械强度较差；荧光型大部分被测物需事先被标记增加 了实验繁琐程度 ；光吸收型只针对有特征吸收光谱的物质进行检测。因此对于光纤生物传感器的发 展 ，无论从结构还是从性能上都还有进一步优化的空间。 制作光纤生物传感器首先需要在光纤表面覆盖上一层有机聚合物材料 j，用于固定生物敏感元。 目前报道 的材料有利用物理吸附效应的聚电解质 、基于共价结合的硅烷偶联剂 等。由于物理吸附 的牢固效果受溶液离子强度和 pH值的影响很大 J，因此本研究选择用基于共价结合的硅烷偶联剂 3．氨丙基三乙氧基硅烷修饰光纤端面。 本研究构建一种基于光纤端面菲涅耳反射效应的光纤生物传感器，使用硅烷偶联剂共价固定生物 敏感元，以生物素．链霉亲和素体系验证了其进行生物传感的可行性，以免疫球蛋 白G的检测验证了其 实用性 。此传感器具有结构简单、无需标记、可靠性高、选择性好等优点。 2 实验部分 2．1 仪器与试剂 2WAJ阿贝折射仪 (上海天呈科技有限公司)；HOYATEK宽带光源 (深圳浩源光电技术有限公司)； 3dB耦合器 (北京莱邦科技有限公司)；YOKOGAWAAQ6370C光谱仪 (日本)；FC-6S光纤切割刀 (日 本)；自制夹具。 3一氨丙基三乙氧基硅烷 ((3-Aminopropy1)triethoxysilane，APTES)，戊二醛 (Glutaraldehyde)，生物素 化试剂 (Sulfosuccinimidyl6一(biotinamido)hexanoate，NHS—biotin)，链霉亲和素(Streptavidin，SA)试剂 (西 2014．12-08收稿 ；2015-04．14接受 本文系国家 自然科学基金资助项 目(No E-mail：langtingting@cjlu．cdu．cn 分 析 化 学 第43卷 格玛奥德里奇(上海)贸易有限公司)；无水乙醇、30％H：O、98％ 浓H：SO 和磷酸盐缓冲溶液 (PBS) (杭州嘉辰化工有限公司)；牛血清 白蛋 白(Bovineserumalbumin，B